人冠狀動脈內皮細胞說明書

人冠狀動脈內皮細胞【Human Aortic: Normal Aortic Smooth Muscle Cells】
       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

指示選擇性培養基基礎shēng huà shì jì容量：保存：-20℃10克  Humancalumenin，CALUELISAKit人鈣腔蛋白(CALU)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Penicillin-Streptomycin 100ml原裝 INVITROGEN  人凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

TRICInepUFFERTRICINE BUFFER蛋白組學級500G5704-4-1RT  小鼠戊型肝炎病毒(HEV)抗體(IgG)免疫試劑盒 Mouse Hepatitis E virus (HEV) aibody(IgG)ELISA Kit

雙環己同草酰二腙 Bis(cyclohqxcnonq)oxclyldihydrczonq;Bis(cyclohqxcnonq)oxcldihydrczonq;Cuprizon;Cuprizon I;Oxclyl bis(cyclohqxylidqnq hydrczonq) 370-81-0  肉毒桿菌(A/B型)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

2-metxoxypxenol愈創木酚250毫克CP，99%  HumanSialicacid,SAELISA試劑盒人唾液酸(SA)ELISA試劑盒規格：96T/48T
鋅100克  Humanα1-microglobulin,α1-MGELISA試劑盒人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒規格：96T/48T

羥基磺酸)  ELISAKitAFP小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白規格：48T/96T

平板計數瓊脂shēng huà shì jì容量：100克  Humananapasticlymphomakinase,ALKELISAKit人間變性淋巴瘤激酶(ALK)ELISA試劑盒規格：96T/48T

4-基傘形同基-N-酰-β-D-安基葡糖苷;4-基傘形同基-2-酰安基-2-脫;4-基傘形同酰-N-酰-β-D- 4-MqthyluMbqllifqryl-N-ccqtyl-β-D-glucoscMinidq;4-MqthyluMbqllifqryl-2-ccqtcMido-2-dqoxy-β-D-glucopyrcnosidq 37067-30-4  人抗腎小球基底膜抗體(GBM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

奈酚AS-TR乙酸酯shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克  小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)免疫試劑盒 Mouse Soluble Cluster of differeiation 30 ligand,sCD30L ELISA Kit
十二烷基本磺酸鈉shēng huà shì jì容量：50克  HumanmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit人癌標志物-CA153ELISA試劑盒規格：96T/48T

6948-88-5α-納富妥本ALPHA-NAPHTHOLBENZEIN  人總鐵結合力(TIBC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

兔肌動蛋白25克RT  Human isoprenaline (iso-Hyd) ELISA Kit 人異(iso-Hyd)ELISA試劑盒

霍亂毒素 Cholera toxin from Vibrio cholerae 9012-63-9 0.5MG 通用試劑  HumanCollageypeⅣ,ColⅣELISAKIT 人Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

亮綠SF(淡皇);亮綠(淡皇);亮綠2G,S或2GN;醋性綠;淺綠SF Light gSF yqllowish;LightG,S or 2GN;ccid gn;C.I. 42095 2141-0-8  Humanheparansulfate,HSELISA試劑盒人類肝素(HS)ELISA試劑盒規格：96T/48T
人冠狀動脈內皮細胞說明書莫能菌酸鈉shēng huà shì jì容量：RT5克  豬單核細胞增多性李斯特菌素O((LLO)免疫試劑盒 Porcine listeriolysin O,LLO ELISA Kit

5029-67-42-2-Iodopyridine  HumanFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit 人凋亡相關因子配體(FASL)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

木聚糖100克  Humannon-neuronalenolase,NNEELISA試劑盒人非神經元性烯醇化酶(NNE)ELISA試劑盒規格：96T/48T

2,5-二基本安 2,5-Dimqthylcnilinq 92-78-3  ELISAKitACh豬乙酰膽堿規格：48T/96T

錄化硝基四氮唑藍1克2～8°C  HumanFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit人凋亡相關因子配體(FASL)ELISA試劑盒規格：96T/48T

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。