大鼠神經(jīng)元細(xì)胞提取物培養(yǎng)

大鼠神經(jīng)元細(xì)胞提取物【Rat Brain : Normal Neuron CellsDerivatives】

大鼠神經(jīng)元細(xì)胞提取物是從大鼠原代神經(jīng)元細(xì)胞提取的，大鼠原代神經(jīng)元細(xì)胞從正常大鼠腦組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

大腸埃希氏菌O157:H7實(shí)時熒光PCR檢測試劑盒TTimosaponin AIII4599知母皂苷AIII

小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌實(shí)時熒光PCR檢測試劑盒TTigogenin77-劍麻皂素

空腸彎曲菌實(shí)時熒光PCR檢測試劑盒TTigecycline269

創(chuàng)傷弧菌實(shí)時熒光PCR檢測試劑盒TTiamulin552975泰妙菌素

溶藻弧菌實(shí)時熒光PCR檢測試劑盒TTiagabine hydrochloride1458219鹽酸噻加賓
Formestane  566-48-3  中文名：福美司坦  分子式：C19H26O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISAKit  

Folic acid  59-30-3  中文名：葉酸  分子式：C19H19N7O6  度：98.0%      小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISAKit              

Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine  175291-56-2  中文名：Fmoc-蘇氨酸磷酸芐酯  分子式：C26H26NO8P  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠水通道蛋白elisa試劑盒   小鼠水通道蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠水通道蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠水通道蛋白試劑盒、小鼠水通道蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Fluoronaphthalene  321-38-0  中文名：  分子式：C10H7F  度：98.0%      小鼠抗胰蛋白酶elisa試劑盒   小鼠抗胰蛋白酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠抗胰蛋白酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗胰蛋白酶試劑盒、小鼠抗胰蛋白酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Fluorocytosine  2022-85-7  中文名：  分子式：C4H4FN3O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠己糖激酶elisa試劑盒   小鼠己糖激酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠己糖激酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠己糖激酶試劑盒、小鼠己糖激酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。
順式-孟魯司特  cis-Montelukast  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物細(xì)胞染色體分離試劑盒20

21(R)-羥基孟魯司特  21(R)-Hydroxy Montelukast  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物細(xì)胞色素C釋放凋亡檢測試劑盒10

21(S)-羥基孟魯司特  21(S)-Hydroxy Montelukast  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物細(xì)胞色素C氧化酶活性測定試劑盒20

孟魯司特二環(huán)己基胺鹽  Montelukast Dicyclohexylamine Salt  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物細(xì)胞周期G0期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10

孟魯司特1,2-二醇(非對映)  Montelukast 1,2-Diol(Mixture of Diastereomers)  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒50

ent-孟魯司特鈉鹽  ent-Montelukast  Salt  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物葉綠體F型ATP酶(FtypeATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20

雙嘧達(dá)莫二-O-β-D-葡萄糖苷酸  Dipyridamole Di-O-β-D-glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物葉綠體外膜功能檢測試劑盒20

雙嘧達(dá)莫-D20 (主要的)  Dipyridamole-D20 (Major)  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物葉綠體總蛋白定量檢測試劑盒20

雙嘧達(dá)莫單-O-β-D-葡萄糖苷酸  Dipyridamole Mono-O-β-D-glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物葉片活性葉綠體分離試劑盒20

酮基他米巴羅汀  Keto Tamibarotene  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物乙醇酸氧化酶(glycolateoxidase)活性比色法定量檢測試劑盒20
大鼠神經(jīng)元細(xì)胞提取物培養(yǎng)嗜酸粒細(xì)胞直接計數(shù)液   Product name said  3-tert-Butoxycarbony-2-(4-anisyl)-4-phenyl-5-oxazolidinecarboxylic acid  196404-55-4  中文名：  分子式：C22H25NO6  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

嗜肺軍團(tuán)桿菌(LP)核酸檢測試劑盒   48T  3-Quinuclidinone  3731-38-2  中文名：3-奎寧環(huán)酮  分子式：C7H11NO  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白1   英文名稱：   Human Retinoblastoma Protein 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   RBP1  4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene  2397-00-4  中文名：4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪  分子式：C30H22N2O2 

食品DNA提取試劑盒   50T  3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid  103335-55-3  中文名：  分子式：C19H29NO3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

十六烷基基溴化胺   50g  3-O-Methyl-Estrone  1624-62-0  中文名：3-氧甲基基雌酮  分子式：C19H24O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。