小鼠關(guān)節(jié)軟骨組織提取物 說明書

小鼠關(guān)節(jié)軟骨組織提取物 【Mouse Bone: Normal Articular Cartilage Derivatives】

軟骨主要功能：（1）軟骨是人身體中不會(huì)發(fā)生癌變的組織。（2）骨骼在發(fā)育初期大部分是由軟骨構(gòu)成的。（3）軟骨一般起到承重負(fù)荷，減少關(guān)節(jié)間骨骼摩擦等作用。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠關(guān)節(jié)軟骨組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運(yùn)輸和保存；

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

IL2(human、Fc標(biāo)簽）0ug9,-Bis(3,5-dihydroxyphenyl)anthracene15371589,-雙(3,5-二羥苯基)蒽

HVEGF165(human、his標(biāo)簽)0ug9-(1H-Benzotriazol-ylmethyl)H-carbazole12433749-(1H-苯并三唑-基甲基)H-咔唑

IL12B(human、his標(biāo)簽)0ug8-Phenyloctanol47278-苯基辛醇

IL12(human)0ug8-Phenyloctanoic acid2654718-苯基辛酸

IFNG(human、his標(biāo)簽)0ug8-Hydroxyodoroside A1765195
Deoxycholic acid  中文名：去氧膽酸  分子式：C24H40O4    豬戊型肝炎病毒(HEV)核酸檢測試劑盒(-PCR法)   48T

Dehydro-α-lapachone  中文名：  分子式：C15H12O3    豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

Dehydrotolvaptan  中文名：  分子式：C26H23ClN2O3    豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)核酸檢測試劑盒(-PCR法)   48T

Dehydroherbarin  中文名：  分子式：C16H14O5    豬流行性腹瀉病毒(PEDV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T              

Dehydroepiandrosterone enanthate  中文名：普拉雄酮庚酸酯  分子式：C26H40O3    豬細(xì)胞間粘附分子1elisa試劑盒   豬細(xì)胞間粘附分子1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T
前杯莧甾酮 HPLC≥96% 5mg FLAG(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升

茜素 HPLC≥98% 20mg FLUORIDE血液抗凝液100毫升

羌活醇 HPLC≥98% 20mg Formolsublimate固著液50毫升

強(qiáng)力霉素 HPLC≥98% 20mg FRUORESCAMINE蛋白質(zhì)濃度熒光定量試劑盒100

羥基紅花黃色素A HPLC≥98% 20mg FRUORESCAMINE蛋白質(zhì)濃度熒光定量試劑盒100

羥基積雪草苷 HPLC≥98% 20mg FSH-BETA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25

羥基積雪草酸 HPLC≥98% 20mg FSH-BETA蛋白共沉淀分析試劑盒5

羥基酪醇 HPLC≥98% 20mg G418溶液10毫克/毫升

羥基酪醇醋酸酯 HPLC≥98% 20mg Gamborg’sB5基礎(chǔ)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

羥基檸檬酸 HPLC≥98% 20mg Gamborg’sB5*培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
小鼠關(guān)節(jié)軟骨組織提取物 說明書可溶性細(xì)胞粘附分子1elisa試劑盒   可溶性細(xì)胞粘附分子1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   可溶性細(xì)胞粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：可溶性細(xì)胞粘附分子1試劑盒、可溶性細(xì)胞粘附分子1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     7-Oxo-β-sitosterol  中文名：7-氧代-β-谷甾醇  分子式：C29H48O2 

可溶性細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒     8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione  666816-98-4  中文名：  分子式：C10H9BrN4O2 

可溶性細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISAKit     8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic acid  547-91-1  中文名：喹方  分子式：C9H6INO4S 

可溶性細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1,2,3,6-Tetra-O-galloyl-β-D-glucose  79886-50-3  中文名：1,2,3,6-四-O-沒食子酰-β-D-葡萄糖  分子式：C34H28O22  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體elisa試劑盒   可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒、可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  8-Azaguanine  134-58-7  中文名：8-氮雜鳥嘌呤  分子式：C4H4N6O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：