小鼠淋巴內(nèi)皮細胞提取物培養(yǎng)

小鼠淋巴內(nèi)皮細胞提取物【Mouse Lymph: Normal Endothelial Cells Derivatives】

小鼠淋巴內(nèi)皮細胞提取物是從小鼠原代淋巴內(nèi)皮細胞提取的，小鼠原代淋巴內(nèi)皮細胞從正常小鼠淋巴組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

氯霉素快速檢測卡（膠體金法）Anthraquinone,5-disulfonic acid di salt8535蒽醌,5-二磺酸二鈉鹽

氯霉素快速檢測卡（膠體金法）2-(Morpholinodithio)benzothiazole9522-(4-嗎啉基二硫代)苯并噻唑

磺胺二甲基嘧啶快速檢測卡（膠體金法）(1S,2R)-Amino-inda264563(1S,2R)-氨基-茚醇

磺胺二甲基嘧啶快速檢測卡（膠體金法）(1R,2R)-Amino-inda6613(1R,2R)-氨基-茚醇

磺胺二甲基嘧啶快速檢測卡（膠體金法）Amorolfine hydrochloride786138鹽酸阿莫洛芬
Lamivudine  134678-17-4  中文名：拉米夫定  分子式：3O3S  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒           

Lafutidine  118288-08-7  中文名：拉呋替丁  分子式：C22H29N3O4S  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體elisa試劑盒   小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒、小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Labetalol hydrochloride  32780-64-6  中文名：鹽酸拉貝洛爾  分子式：C19H25ClN2O3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠橫紋肌輔肌動蛋白elisa試劑盒   小鼠橫紋肌輔肌動蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠橫紋肌輔肌動蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠橫紋肌輔肌動蛋白試劑盒、小鼠橫紋肌輔肌動蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

L-(+)-Arginine  74-79-3  中文名：L-(+)-精氨酸  分子式：C6H14N4O2  度：98.0%  關鍵詞：    豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1elisa試劑盒   豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒、豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Ketoprofen  22071-15-4  中文名：酮基布洛芬  分子式：C16H14O3  度：99.0%      豚鼠主要組織相容性復合體elisa試劑盒   豚鼠主要組織相容性復合體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠主要組織相容性復合體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠主要組織相容性復合體試劑盒、豚鼠主要組織相容性復合體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。
夫定  Brivudine  質(zhì)量規(guī)格：度≥99.0%，含量≥98.5% 茶葉維生素U(S-Methylmine)比色法定量檢測試劑盒20

夫定(標準品)  Brivudine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品 差異相減雜交試劑盒10

卡巴他賽  Cabazitaxel  質(zhì)量規(guī)格：≥99% 產(chǎn)氣莢膜梭菌α(Closidiumperfringenscpa)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20

米托蒽醌  Mitoxantrone  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,BR 產(chǎn)氣莢膜梭菌腸(Closidiumperfringenscpe)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20

拉莫三嗪   Lamotrigine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(EerotoxigenicE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20

拉莫三嗪 （標準品）  Lamotrigine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品 腸出血性大腸埃希菌(EerohaemorrhagicE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20

D-半乳糖醛酸  D-Galacturonic acid  質(zhì)量規(guī)格：進分,97%,一水 腸桿菌EE營養(yǎng)肉湯500毫升

D-半乳糖醛酸(標準品)  D-Galacturonic acid  質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測定；一水物 腸集聚型大腸埃希菌(EeroaggregativeE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20

骨化三醇  Calcitriol  質(zhì)量規(guī)格：度≥98%,BR 腸侵襲性大腸桿菌(EeroinvasiveE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20

坎地沙坦酯  Candesartan cilexetil  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng) 腸胃活檢螺旋桿菌(H.PYLORI)吉姆薩(GIEMSA)染色試劑盒50
小鼠淋巴內(nèi)皮細胞提取物培養(yǎng)雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISAKit                 Phyllostine  27270-89-9  中文名：  分子式：C7H6O4 

肌醇   25g  Quetiapine  111974-69-7  中文名：喹硫平  分子式：C21H25N3O2S  度：98.0%  關鍵詞： 

活性氧   英文名稱：   Human Reactive Oxygen Species   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ROS  4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester  155405-80-4  中文名：  分子式：C16H16N4O3 

活化蛋白C   英文名稱：   Activated protein C   英文縮寫：   APC   規(guī)格：   48T/96T  Norandrostenedione  中文名：19-去甲-4-雄烯二酮  分子式：C18H24O2 

磺酸 SHES   25g  Pseudoprotodioscin  102115-79-7  中文名：偽原薯蕷皂苷  分子式：C51H82O21  度：98.0%  關鍵詞：  細胞毒活性; 甾苷; 天門冬屬; 薯蕷屬; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。