大耳山羊肺細(xì)胞；LDG-1說明書

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產(chǎn)品描述：
細(xì)胞名稱 大耳山羊肺細(xì)胞；LDG-1說明書
形態(tài)特性成纖維細(xì)胞樣

生長特性貼壁生長

特征特性該細(xì)胞系來源于一雄性大耳山羊的肺組織。1990年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。

培養(yǎng)條件M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

傳代方法1：2傳代；3-4天一次

傳代情況P4

凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測熒光法（-）

STR-

同工酶

染色體
冷凍保存細(xì)胞之方法：
大耳山羊肺細(xì)胞；LDG-1說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）大耳山羊肺細(xì)胞；LDG-1說明書準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1

SIGLEC6 Others Human 人 SIGLEC6 / CD327 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

外周血白細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

ERA-2細(xì)胞，人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞 人癌阿霉素耐藥細(xì)胞株,MCF/Adr細(xì)胞 臺(tái)盼藍(lán)TB

猴源細(xì)胞

IL1R2 Others Human 人 IL1R2 / CD121b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大耳山羊肺細(xì)胞；LDG-1說明書CL-0403NCI-H524(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

ACBD6 Others Human 人 ACBD6 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHUVEC NA

Jecket細(xì)胞，淋巴瘤細(xì)胞 人肺腺癌細(xì)胞,SPC-A1細(xì)胞 EC109，人食管癌細(xì)胞

貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞;PG-4(S+L-)

ACP5 Others Human 人 ACP5 / AP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
注意事項(xiàng)：
?1.一般客戶拿到大耳山羊肺細(xì)胞；LDG-1說明書后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細(xì)胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。

、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。

購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購的細(xì)胞名稱、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。
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SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1

HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL

TE-1人食管癌細(xì)胞 Human esophageal cancer cell line TE-1. RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

IL3 Protein Rat 重組大鼠 IL3 / ierleukin 3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人毛發(fā)干細(xì)胞(HHDPC)( 5×105 ) MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞 Mouse
大耳山羊腎細(xì)胞；LDG-2價(jià)格CL-0402NCI-H520(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

IFNA1 Others Rat 大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

U266人骨髓瘤細(xì)胞 U266 human myeloma cell 1640+15% FBS

IL33 Protein Canine 重組狗 IL33 / Ierleukin-33 / NF-HEV 蛋白

NCI-H2227(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 KG-1(白血病細(xì)胞)
收到大耳山羊腎細(xì)胞；LDG-2價(jià)格如何處理？
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時(shí)與技（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。