細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6價(jià)格準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。 二.細(xì)胞處理: 1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6價(jià)格貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。點(diǎn)擊進(jìn)入了解更多大鼠源細(xì)胞。 產(chǎn)品描述: 細(xì)胞名稱(chēng) 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6價(jià)格 形態(tài)特性成纖維細(xì)胞樣 生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng) 特征特性C6是由Benda等用N-亞硝基甲脲誘導(dǎo)的大鼠膠質(zhì)瘤克隆,并經(jīng)過(guò)一系列的體外培養(yǎng)和動(dòng)物傳代交替后建成的。該細(xì)胞表達(dá)S-100;產(chǎn)生生長(zhǎng)激素;糖皮質(zhì)激素作用下可以產(chǎn)生磷酸甘油脫氫酶。當(dāng)細(xì)胞從低密度生長(zhǎng)至回合狀態(tài)時(shí),S-100產(chǎn)量增加10倍。 培養(yǎng)條件F10:Ham'sF10NutrientMixture2.5%FBS+15%HS 傳代方法1:2~1:3傳代;2~3天換液1次。 傳代情況P50 凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測(cè)培養(yǎng)法(-) STR- 同工酶 染色體
注意事項(xiàng): ?1.一般客戶(hù)拿到大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6價(jià)格后,應(yīng)該注意什么? 客戶(hù)收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開(kāi)封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。 收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。 細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些? (1)客戶(hù)造成細(xì)胞污染,不重發(fā); (2)客戶(hù)不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā); (5)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā); (6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā); (7)視具體情況而定。 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-01 CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人卵巢上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL SP2/0-Ag14細(xì)胞,鼠骨髓瘤細(xì)胞 BALB/3T3(BALB/C小鼠胚成纖維細(xì)胞) 人羊膜細(xì)胞;WISH CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 標(biāo)簽) RM-1(小鼠前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 VIPR2 / VPAC2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6價(jià)格雞傳染性貧血病毒(CIAV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A1(hNP A1)免疫試劑盒 Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1,hNP A1 ELISA Kit 可溶性CD163分子(sCD163)ELISA試劑盒 ,英文名: sCD163 ELISA Kit RatEotaxin1ELISA試劑盒大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T HumanDopamineD1receptor,D1RELISA試劑盒人多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T HumanHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit人熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 冷凍保存細(xì)胞之方法: 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6價(jià)格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |