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冷凍保存細胞之方法: 大鼠正常皮膚角質細胞;RNSK/HL-010價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)大鼠正常皮膚角質細胞;RNSK/HL-010價格準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 CM-R081大鼠冠狀動脈內皮細胞*培養基100mL OLR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 OLR1 / LOX1 人細胞裂解液 (陽性對照) 小鼠背脊髓神經元MN-dsc Tsu-Prl細胞,非雄激素依賴型前列腺癌 小鼠胚胎成纖維細胞,3T6-Swiss albino細胞 人前列腺上皮細胞HPEpiC HS 683(人腦膠質瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 3T3-L1(小鼠胚胎成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H059人子宮頸上皮細胞*培養基100mL 人肝內膽管上皮細胞RNAHIBEpiC miRNA5 μg 大鼠正常皮膚角質細胞;RNSK/HL-010價格雞免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 人游離雌三醇(FE3)免疫試劑盒 human free Esiol,FE3 ELISA KIT 可溶性腺苷酸環化酶(sAC)ELISA試劑盒 ,英文名: sAC ELISA Kit RatCyclosporineA,CsAELISA試劑盒大鼠環孢素A(CsA)ELISA試劑盒規格:96T/48T Humancytotoxin,CTXELISA試劑盒人細胞毒素(CTX)ELISA試劑盒規格:96T/48T HumanGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit人粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒規格:96T/48T 注意事項: ?1.一般客戶拿到大鼠正常皮膚角質細胞;RNSK/HL-010價格后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 |