我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,產品名稱貨期短,價格優,售后齊全。 產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 | 人卵巢上皮細胞提取物說明書 | Human Ovary : Normal Ovarian Epithelial Cell Derivatives | EYX99034 |
人卵巢上皮細胞提取物【Human Ovary : Normal Ovarian Epithelial Cell Derivatives】 人卵巢上皮細胞提取物是從人卵巢上皮細胞提取的,人卵巢上皮細胞從正常人卵巢組織制備。正常人卵巢組織采集自各地方醫院,采集工作根據IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 細胞培養方法: 1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代 ①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基; ⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。 2、細胞復蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。 3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種 ①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化; ③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
實驗事項: 1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。 2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。 3. 孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。 4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數。 5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。 6. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。 7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。 一次性濾器(Pall,0.22μm,水系)5-Benzimidazolecarboxylic acid1578865-苯并咪唑甲酸 一次性濾器(直徑13mm,0.45um,水系,PES膜,獨立包裝)個/盒 0元Benzoin isopropyl ether66528安息香 一次性濾器(直徑25mm,0.22um,水系,PES膜,獨立包裝)個/盒 3元m-Anisic acid5868間茴香酸 一次性細胞篩2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate9二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯 一次性研磨杵根/包 元p-Anisoin1192對茴香偶姻 Ondansetron hydrochloride 中文名:鹽酸昂丹司瓊 分子式:C18H20ClN3O 中文名稱 方法 規格 Ondansetron 中文名:昂丹司瓊 分子式:C18H19N3O 小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISAKit Olopatadine hydrochloride 中文名:鹽酸奧洛他定 分子式:C21H24ClNO3 小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISAKit Oleandrin 中文名: 分子式:C32H48O9 小鼠維生素C(VC)ELISAKit Olanzapine 中文名:奧氮平 分子式:C17H20N4S 中文名稱 方法 規格 硬脂酸甲酯(>99.5%(GC),標準物質) Methyl Stearate 質量規格:>99.5%(GC),標準物質 人γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 Human IFN-γ ELISA Kit 亞麻酸甲酯(>98.0%(GC),標準物質) Methyl Linolenate 質量規格:>98.0%(GC),標準物質 人γ干擾素受體(IFN-γR)試劑盒 Human Ierferon γ Receptor,IFN-γR ELISA Kit 亞油酸甲酯(>99.0%(GC),標準物質) Methyl Linoleate 質量規格:>99.0%(GC),標準物質 人γ干擾素誘導單核細胞因子(MIG/CXCL9)試劑盒 Human monocyte ierferon gamma inducing factor,MIG ELISA Kit 1-十一烯(>99.5%(GC),標準物質) 1-Undecene 質量規格:>99.5%(GC),標準物質 人γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)試劑盒 Human IFI16 ELISA Kit 1-十二烯(>99.5%(GC),標準物質) 1-Dodecene 質量規格:>99.5%(GC),標準物質 人γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)試劑盒 Human γ glamylcysteine syhetase,γ-GCS ELISA Kit 1-十三烯(>99.5%(GC),標準物質) 1-Tridecene 質量規格:>99.5%(GC),標準物質 人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)ELISA檢測試劑盒Humanγ-glamylsysteinesyhetase,γ-ECSELISAKit 96T/48T 1-十四烯(>99.5%(GC),標準物質) 1-Tetradecene 質量規格:>99.5%(GC),標準物質 人γ-谷氨酰環化轉移酶(GGCT)試劑盒 Human GGCT ELISA Kit 1-十五烯(>99.0%(GC),標準物質) 1-Pentadecene 質量規格:>99.0%(GC),標準物質 人γ谷氨酰轉移酶(GGT)試劑盒 Human GGT ELISA Kit 1-十六烯(>99.5%(GC),標準物質) 1-Hexadecene 質量規格:>99.5%(GC),標準物質 人γ肽(Pγ)ELISA檢測試劑盒HumanPeptideγ,PγELISAKit 96T/48T 1-十七烯(>99.5%(GC),標準物質) 1-Heptadecene 質量規格:>99.5%(GC),標準物質 人κB抑制蛋白激酶(IKK)試劑盒 Human I kappa B kinase,IKK ELISA kit 人卵巢上皮細胞提取物說明書Tapentadol Hydrochloride 中文名: 分子式:C14H24ClNO 生長激素結合蛋白 英文名稱: GH-binding protein 規格: 48T/96T 英文縮寫: P Tanshinone IIB 中文名:丹參酮IIB 分子式:C19H18O4 環0酸鳥苷 英文名稱: cyclic adenosine monophosphate 規格: 48T/96T 英文縮寫: cGMP Tanshinone IIA 中文名:丹參酮IIA 分子式:C19H18O3 脂肪酸合成酶(FAS)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 Tanshinone I 中文名: 分子式:C18H12O3 蔗糖0酸化酶(SP)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 Sunitinib malate 中文名:蘋果酸舒尼替尼 分子式:C26H33FN4O7 硫氧還蛋白氧化還原酶(xR)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 注意事項: 1. 接收到,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。 2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。 3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。 4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。 6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。 7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。 |