人子宮平滑肌細胞提取物【Human Cervix : Normal Cervical Smooth Muscle Cell Derivatives】 人子宮平滑肌細胞提取物是從人子宮平滑肌細胞提取的,人子宮平滑肌細胞從正常人子宮組織制備。正常人子宮組織采集自各地方醫院,采集工作根據IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 | 人子宮平滑肌細胞提取物價格 | Human Cervix : Normal Cervical Smooth Muscle Cell Derivatives | EYX99036 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,產品名稱貨期短,價格優,售后齊全。 細胞培養方法: 1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代 ①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基; ⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。 2、細胞復蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。 3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種 ①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化; ③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
實驗事項: 1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。 2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。 3. 孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。 4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數。 5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。 6. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。 7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。 注意事項: 1. 接收到,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。 2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。 3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。 4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。 6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。 7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。 氧化型谷胱甘肽(GSSG) 1g/5gN-Aminophthalimide18758N-氨基 胰蛋白酶1:2 25g5-Aminouracil93225-氨基尿嘧啶 乙醇脫氫酶(ADH) 5KUAmoxicillin trihydrate6133羥氨芐青霉素三水合物 乙二醇 Ethylene Glycol 5×25ml3-Amino-methylbenzamide19663-氨基-甲基苯甲酰胺 乙酰輔酶A 5mg2-(2-Aminothiazole-yl)-methoxyiminoacetic acid658721氨噻肟酸 Olopatadine hydrochloride 140462-76-6 中文名:鹽酸奧洛他定 分子式:C21H24ClNO3 人脂蛋白脂酶(LPL)酶聯吸附測定試劑盒 Human LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA Kit Tenofovir 147127-20-6 中文名:泰諾福韋 分子式:C9H14N5O4P 人脂多糖結合蛋白(LBP)酶聯吸附測定試劑盒 Human LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA Kit Naftopidil dihydrochloride 57149-08-3 中文名:鹽酸萘哌地爾 分子式:C24H30Cl2N2O3 人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒 Zileuton 111406-87-2 中文名:齊留通 分子式:C11H12N2O2S 人整合素αⅤβ3(IegrinαⅤβ3)ELISA試劑盒 Cefozopran hydrochloride 113981-44-5 中文名:鹽酸頭孢唑蘭 分子式:C19H18ClN9O5S2 人真胰島素(TI)ELISA試劑盒 熒光桃紅B,酸性紅92 Phloxine B 質量規格:AR 人緊密連接蛋白1(ZO1)試劑盒 Human tight junction protein 1,ZO1 ELISA Kit 依萊鉻紅B Eriochrome Red B 質量規格:AR 人精氨酸(Arg)試劑盒 Human Arginine,Arg ELISA kit 固紅RL Fast Red RL Salt 質量規格:>90%,BR 人精氨酸加壓素(AVP)ELISA檢測試劑盒Humanargininevasopressin,AVPELISAKit 96T/48T 固紅紫色LB鹽 Fast Red Violet LB Salt 質量規格:>95%,BR 人精氨酸酶(Arg)ELISA檢測試劑盒HumanArginase,ArgELISAKit 96T/48T 莧菜紅 Amaranth 質量規格:BS 人精氨酸酶2(ARG2)試劑盒 Human ARG2 ELISA Kit 麗春紅4R,新胭脂紅,亮麗春紅5R,酸性紅18 Brilliant ponceau 5R 質量規格:BS 人精氨酸脫羧酶(ADC)試劑盒 Human Arginine Decarboxylase,ADC ELISA Kit 酚藏花紅 Phenosafranine 質量規格:>80% 人精氨酰-NA合成酶(RARS)試劑盒 Human Arginyl-NA Syhetase,RARS ELISA Kit 天狼星玫紅,BB Sirius Rose BB 質量規格:AR 人精胺合成酶(SRM)試劑盒 Human spermidine syhase,SRM ELISA kit 釕紅 Ruthenium Red 質量規格:>95% 人精脒/精胺N(1)-乙酰轉移酶樣蛋白1(SATL1)試劑盒 Human SATL1 ELISA Kit 藻紅B,四熒光素 Erythrosin B 質量規格:BS 人巨泌乳素試劑盒 Human Macroprolactin ELISA Kit 人子宮平滑肌細胞提取物價格Taxilluside A 1661914-46-0 中文名: 分子式:C18H24O10 Humancytovillin/ezrin,CVLELISA試劑盒人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(CVL)ELISA試劑盒規格:96T/48T n-Butyl β-D-fructofuranoside 80971-60-4 中文名:基-β-D-果糖苷 分子式:C10H20O6 組織INSULI激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次 Palmitone 502-73-8 中文名:棕櫚酮 分子式:C31H62O Humanplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid 54232-58-5 中文名: 分子式:C18H30O3 兔子血纖蛋白原降解產物(FDP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Acetylatractylodinol 61582-39-6 中文名:乙酰蒼術素醇 分子式:C15H12O3 Rat angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 大鼠生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA試劑盒 |