冷凍保存細胞之方法: 小鼠雜交瘤細胞;IIIE6培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 產(chǎn)品描述: 細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞;IIIE6培養(yǎng) 形態(tài)特性淋巴母細胞樣 生長特性半貼壁生長 特征特性可產(chǎn)生單克隆抗體。 培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)10%FBS 傳代方法1:3傳代,2-3天傳一代 傳代情況C24 凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測陰性 STR 同工酶 染色體
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)小鼠雜交瘤細胞;IIIE6培養(yǎng)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 注意事項: ?1.一般客戶拿到小鼠雜交瘤細胞;IIIE6培養(yǎng)后,應(yīng)該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。 細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發(fā); (2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā); (5)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā); (6)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā); (7)視具體情況而定。 CM-H108人表皮黑色素細胞*培養(yǎng)基100mL ROBO4 Others Mouse 小鼠 ROBO4 人細胞裂解液 (陽性對照) 小鼠視網(wǎng)膜muller細胞*培養(yǎng)基 100mL SW480-EGFP-puro [SW480-pSB4](慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人結(jié)腸腺癌細胞 SW480-EGFP-puro [SW480-pSB4] (leiviral consuct stable sain) of human colon adenocarcinoma cells 1640+10% FBS+2μg/ml puromycin IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白 人少突膠質(zhì)前體細胞(HOPC-os)(懸浮生長) 人間充質(zhì)干細胞-臍帶 U251人膠質(zhì)瘤細胞 小鼠雜交瘤細胞;IIIE6培養(yǎng)牛結(jié)蛋白(Des)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 人轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)免疫試劑盒 Human TGF-α ELISA Kit 鱗狀細胞癌相關(guān)抗原(SCCAg)ELISA試劑盒 ,英文名: SCCAg ELISA Kit RatBcl-2associatedXprotein,BaxELISA試劑盒大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T HumanCollageypeⅢ,ColⅢELISA試劑盒人Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T HumanEsadiolreceptor,ERELISAKit人雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,小鼠雜交瘤細胞;IIIE6培養(yǎng)貨期短,價格優(yōu),售后齊全。點擊進入了解更多小鼠源細胞。 |