大鼠表皮黑色素細胞提取物說明書

大鼠表皮黑色素細胞提取物【Rat Skin: Normal MelanocytesDerivatives】

大鼠表皮黑色素細胞提取物是從大鼠原代表皮黑色素細胞提取的，大鼠原代表皮黑色素細胞從正常大鼠皮膚組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

超低分子量蛋白Marker III（3.0kd）   次 5-BenzylH-tetrazole1848955-芐基H-四唑

超低分子量蛋白Marker IV(3.35kD)   次 5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate135743N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-芐酯

低分子量蛋白Marker II（14.416KD）   次 5-Benzyl L-glutamate16763L-谷氨酸5-芐酯

低分子量蛋白質(zhì)Marker I (14.47.4kD)   次 5-Benzyl D-glutamate25783D-谷氨酸5-苯甲酯

高分子量蛋白Marker（KD）   次 5-Benzoylpentanoic acid414425-苯甲酰基戊酸
Flumethasone  2135-17-3  中文名：氟米松  分子式：C22H28F2O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠β甘露糖苷酶elisa試劑盒   小鼠β甘露糖苷酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠β甘露糖苷酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠β甘露糖苷酶試劑盒、小鼠β甘露糖苷酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  

Flumequine   42835-68-7  中文名：氟甲喹鈉  分子式：C14H11FNNaO3  度：98.0%      小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒  

Flumequine  42835-25-6  中文名：氟甲喹  分子式：C14H12FNO3  度：98.0%      小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒  

Fludarabine  21679-14-1  中文名：氟達拉賓  分子式：C10H12FN5O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒  

Floribundone 1  118555-84-3  中文名：  分子式：C32H22O10  度：99.0%  關(guān)鍵詞：  光葉決明; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒
水飛薊素  Silymarin  質(zhì)量規(guī)格：水飛薊素UV 80%；雙賓30% 小鼠催乳素釋放激素(PRH)ELISA試劑盒 ，英文名： PRH ELISA Kit

鐵蛋白  Ferritin  質(zhì)量規(guī)格：BR，20%水溶液 小鼠催乳素抑制激素(PIH)ELISA試劑盒 ，英文名： PIH ELISA Kit

鵝去氧膽酸(標準品)  Chenodeoxycholic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,標準品 小鼠存活素(Surv)ELISA試劑盒 ，英文名： Surv ELISA Kit

鵝去氧膽酸  Chenodeoxycholic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98% 小鼠大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)ELISA試劑盒 ，英文名： Acta2/Actsa/Actvs ELISA Kit

胰島素(牛)  INSULIN  質(zhì)量規(guī)格：BR，27U/mg,進分 小鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

胰島素(牛)  INSULIN  質(zhì)量規(guī)格：BR，27U/mg,進分 小鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒 ，英文名： Big ET ELISA Kit

L-天門冬氨酸鉀  L-Aspartate Potassium  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP1)ELISA試劑盒 ，英文名： MCP1 ELISA Kit

輔酶Q10,泛醌  Coenzyme Q10,Ubiquinone  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1)ELISA試劑盒 ，英文名： MCP-1 ELISA Kit

輔酶Q10(標準品)  Coenzyme Q10  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

維生素A醋酸酯（標準品）  vitamin A acetate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標準品 小鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA檢測試劑盒Mousemonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAkit 96T/48T
大鼠表皮黑色素細胞提取物說明書四甲基化銨   100g  4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene  1533-45-5  中文名：4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪  分子式：C28H18N2O2  度：98.0%   

水質(zhì)檢測儀、比色計試劑   Water quality detector, colorimeic reage  4-(Phenylthio)benzyl alcohol  6317-56-2  中文名：  分子式：C13H12OS  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

水質(zhì)讀卡儀器   Water quality reading card insume  4-(N-Methyl)-aminoantipyrine  519-98-2  中文名：  分子式：C12H15N3O  度：95.0%  關(guān)鍵詞： 

水硬度快速測試盒   Water hardness rapid test case  α-Spinasterol glucoside  1745-36-4  中文名：α-菠甾醇葡萄糖苷  分子式：C35H58O6  度：97.0%  關(guān)鍵詞：  抗真菌; 豆甾烷; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

水樣中六價鉻離子（Cr6+）濃度測試盒   可見分光光度法   50管/48樣  4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-5-yl-formyl  147118-37-4  中文名：  分子式：C16H18FN3O3S