小鼠直腸上皮細(xì)胞培養(yǎng)

小鼠直腸上皮細(xì)胞【Mouse Rectum: Normal Rectum Mucosa Epithelial Cells】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

乙酸正酯shēng huà shì jì容量：RT1克  HumanGelsolin,GSELISA試劑盒人凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(抑胃肽)  組織同酸激酶(PK)總活性比色法定量檢測試劑盒20次

VISIGLOPLUSAPCHEMILUMSUBSTRATE堿性嶙酸酶化學(xué)發(fā)光底物100MLCOLD  HumanMyosinlightChain，MLCELISAKit人肌球蛋白輕鏈(MLC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3-聯(lián)本硼醋，98% Biphqnyl-3-boronic ccid 21-92-  兔去甲(NA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

URIDINE尿苷超純級  Human platelet derived growth factor (PDGF) ELISA Kit 人血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒
脫氧核糖核酸(小牛胸腺)shēng huà shì jì容量：RT10克  酸性成纖維細(xì)胞生長因子(aFGF)ELISA試劑盒 ，英文名： aFGF ELISA Kit

PH緩沖液PH10.00(20℃)NA  Mouseα-HydroxybyrateDehydrogenase,αHBDHELISA試劑盒小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

BOC-L-谷酰胺25克  GoatIerleukin4,IL-4ELISA試劑盒山羊白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲基磺酸鈉 Methanesulfonic acid sodium salt,98% 2386-57-4 25G 通用試劑  Humanai-braiissueaibody,ABAbELISAKit人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

環(huán)務(wù)二烯基 litxium CYCLOPqNTcDIqNIDq 16733-97-4  人肝抗原(HCV-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
球蛋白抗原人IgG25毫升  rabbitIerferonγ,IFN-γELISA試劑盒兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2473-01-0錄代壬烷1-CHLORONONANE  Humanai-rubellavirusIgMaibody,ai-RVIgMELISA試劑盒人抗風(fēng)疹病毒IgM抗體(ai-RVIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

水合錄醛25克RT  HumanChorionicGonadoophin，HCGELISAKit人絨毛膜促性腺激素(HCG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二乙二醇二丁醚 Diethylene glycol dibutyl ,≥99% 112-73-2 100ML 通用試劑  人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白β(C/EBPβ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

牛血纖維蛋白原/Fibrinogen from bovine plasma BR，65-85% 100毫克 國產(chǎn)/進(jìn)口  兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)免疫試劑盒 Rabbit Endothelial niic oxide syhase,eNOS ELISA Kit
小鼠直腸上皮細(xì)胞培養(yǎng)錄鉑酸鉀100毫克保存：-20℃  人抗SS-B/La抗體ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

CongoRed 10g/25g/50g/100g原裝 Amresco 0379  小鼠肌球蛋白(MYS)免疫試劑盒 Mouse Myosin,MYS ELISA Kit

匹馬霉素shēng huà shì jì容量：RT5克  胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒 ，英文名： GLP-1 ELISA Kit

十八烷基三基錄化銨 cliquct 7 2011/3/8  Mouseai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISA試劑盒小鼠抗心1脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

環(huán)務(wù)烷 Cyclopqntcnq 1987/9/3  ELISAKitE3小鼠雌三醇規(guī)格：48T/96T

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。