大鼠尿道上皮細(xì)說明書

大鼠尿道上皮細(xì)【Rat Urinary Tract ：Normal Urinary Tract Epithelial Cells】

 產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

鹽酸土霉素100克  組織甘油三酯(iglyceride)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次
SS瓊脂Agar-S.S  Humanmammaliaargetofrapamyein,mTORELISAKit人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
神經(jīng)酸，英文名或英文縮寫：Nervonic acid，級別：CP，98%，規(guī)格：100克  人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
吩嗪乙基鹽 Phen ethosulfate,≥95% 10510-77-7 1G 通用試劑  Human abnormal prothrombin (APT) ELISA Kit 人異常凝血酶原(APT)ELISA試劑盒
雙三拂烷磺酰亞安 litxium bis(trifluoromqthcnqsulphonyl)imidq 90076-62-6  HumanHyaluronicacid,HAELISAKit 人透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
酸鉀，英文名或英文縮寫：potewwium iodate，級別：CP，規(guī)格：500克  HumanHeatShockProtein20,HSP-20ELISA試劑盒人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
(a-乙酸)  組織輔酶A含量比色法定量檢測試劑盒20次
,CRYSTALLINE(環(huán)已亞胺)超純級100MGCOLD  HumanMaixmetalloproteinase7,MMP-7ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鄰安基本加醋(易制讀-1) cnthrcnilic ccid 118-9-3  山羊白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Nystatin制真菌素250毫克BR，魚鱗提取  Rat apolipoprotein A1 (apo-A1) ELISA Kit 大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒
偏釩酸銀5克  HumanIerleukin6,IL-6ELISAKIT 人白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
600-18-0酸(怕熱+4℃)2-Oxobutyric acid  Humannonmethylatedoligonucleotide,NONELISA試劑盒人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
茜素黃R鈉鹽shēng huà shì jì容量：5克  ELISAKitAChRab豬乙酰膽堿受體抗體規(guī)格：48T/96T
2,5-二基溴本 2,5-Dimqthylbromobqnzqnq 223-94-6  HumanFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
京尼平甙，英文名或英文縮寫：Geniposide，級別：BR，98%，規(guī)格：25克  人維生素C(VC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠尿道上皮細(xì)說明書離析酶R-10，英文名或英文縮寫：Macerozyme R-10，級別：BR，30u/mg，芬末，規(guī)格：5克  人自然抗性相關(guān)巨噬細(xì)胞蛋白2(AMP-2)免疫試劑盒 Human natural resistance-associated macrophage protein 2,AMP2 ELISA kit
9002-18-0瓊脂粉;瓊脂;瓊膠;洋菜Agar-Agar;Gelose;2X YT Agar;Agar;GuM agar  硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒 ，英文名： x ELISA Kit
TEMED四甲基乙二安超純級透明液體RTsigma  RatApolipoproteinE,Apo-EELISA試劑盒大鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
2,4-二 2,4-Difluoro,98% 1550-35-2 5G 通用試劑  HumanclusterOfdiffereiation,CD4ELISA試劑盒人CD4分子(CD4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
奎寧/(8S,9R)-6-甲氧雞納-9-醇鹽/奎寧鹽/奎寧酯//金雞納鹽/Quinine sulfate BR，98%， 25克 國產(chǎn)/進(jìn)口  Humanepidemicparotitis,EPELISAKit人流行性腮腺炎(EP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。