人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞說明書

人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞【Human Kidney : Normal Glomerular Endothelial Cells】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

直接剛果紅，英文名或英文縮寫：Congo red，級別：超純，99%，規(guī)格：250毫克  小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)免疫試劑盒 Mouse eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA Kit

6-FurfurylAminopurine 250mg/1g原裝 Sigma K3378  玉米特定基因序列(IVR)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

Dietxyladipate肥酸乙酯100克CP  Humacellreceptor,TCRELISA試劑盒人T細(xì)胞受體(TCR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

碳醋銫 CqsiuM ccronctq 234-17-8  ELISAKitADRA1A小鼠能a1A受體規(guī)格：48T/96T

2-基1唑shēng huà shì jì容量：1公斤  HumanAspaateaminoansferase,ASTELISAKit人天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠血清(無菌)shēng huà shì jì容量：RT100克  人神經(jīng)激肽B(NKB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(維生素分析酪蛋白水解物)  小鼠抑瘤素M(OSM)免疫試劑盒 Mouse Oncostatin-M,OSM ELISA KIT

L-精酸鋇鹽500克  綿羊痘病毒(SPPV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

鱗醋二輕鋁 cluminum dixy7nogqn phosphctq 13230-20-  HumanProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISA試劑盒人前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-果糖-6-鱗醋二內(nèi)(-20℃) D-FRUCTOSq 6-PHOSPHcTq DIwo7ium ScLT 6177-86-6  ELISAKitt-PA小鼠組織型纖溶酶原激活劑規(guī)格：48T/96T
十八烯酸乙酯，英文名或英文縮寫：etxyl oleate，級別：AR，99%，規(guī)格：1克  血管緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)ELISA試劑盒 ，英文名： ANG-ⅠR ELISA Kit

1898-66-42,2-二本基-1-苦基(+4℃)1,1-DIpxenYL-2-PICRYLHYDRAZYL  MouseGelsolinELISA試劑盒小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2,2′-O-Cyclouridine2,2-環(huán)尿苷100毫克試劑級，80%  ELISAKitTF兔子組織因子規(guī)格：48T/96T

2-同務(wù)二醋(+4℃) 2-Kqtoglutcric ccid 38-20-7  ACTHELISAKit魚促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

pxenOL,SATURATED飽和酚 (pH 6.6/7.9)生物技術(shù)級100MLCOLD  人核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞說明書免疫血清羊抗人IgGshēng huà shì jì容量：RT1公斤  Humanierleukieceptorassociatedkinase,IRAKELISA試劑盒人白介素受體相關(guān)激酶(IRAK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

基酸參標(biāo)準(zhǔn)NA  組織二酯酶1(PDE1)活性熒光定量檢測試劑盒10次

對胺蘭250克2～8°C  HumanIerleukin1α，IL-1αELISAKit人白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-羥基 2-Hydroxy,99% 614-75-5 10G 通用試劑  人乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

錄化鑭七水合物 LcNTHcNUM CHLORIDq HqPTcHYDRcTq 1002-84-0  豬組胺(HIS)免疫試劑盒 Porcine Histamine ELISA Kit

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。