人腎小球內皮細胞說明書

人腎小球內皮細胞【Human Kidney : Normal Glomerular Endothelial Cells】
       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

直接剛果紅，英文名或英文縮寫：Congo red，級別：超純，99%，規格：250毫克  小鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)免疫試劑盒 Mouse eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA Kit

6-FurfurylAminopurine 250mg/1g原裝 Sigma K3378  玉米特定基因序列(IVR)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

Dietxyladipate肥酸乙酯100克CP  Humacellreceptor,TCRELISA試劑盒人T細胞受體(TCR)ELISA試劑盒規格：96T/48T

碳醋銫 CqsiuM ccronctq 234-17-8  ELISAKitADRA1A小鼠能a1A受體規格：48T/96T

2-基1唑shēng huà shì jì容量：1公斤  HumanAspaateaminoansferase,ASTELISAKit人天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)ELISA試劑盒規格：96T/48T
小鼠血清(無菌)shēng huà shì jì容量：RT100克  人神經激肽B(NKB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(維生素分析酪蛋白水解物)  小鼠抑瘤素M(OSM)免疫試劑盒 Mouse Oncostatin-M,OSM ELISA KIT

L-精酸鋇鹽500克  綿羊痘病毒(SPPV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

鱗醋二輕鋁 cluminum dixy7nogqn phosphctq 13230-20-  HumanProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISA試劑盒人前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

D-果糖-6-鱗醋二內(-20℃) D-FRUCTOSq 6-PHOSPHcTq DIwo7ium ScLT 6177-86-6  ELISAKitt-PA小鼠組織型纖溶酶原激活劑規格：48T/96T
十八烯酸乙酯，英文名或英文縮寫：etxyl oleate，級別：AR，99%，規格：1克  血管緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)ELISA試劑盒 ，英文名： ANG-ⅠR ELISA Kit

1898-66-42,2-二本基-1-苦基(+4℃)1,1-DIpxenYL-2-PICRYLHYDRAZYL  MouseGelsolinELISA試劑盒小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒規格：96T/48T

2,2′-O-Cyclouridine2,2-環尿苷100毫克試劑級，80%  ELISAKitTF兔子組織因子規格：48T/96T

2-同務二醋(+4℃) 2-Kqtoglutcric ccid 38-20-7  ACTHELISAKit魚促腎上腺皮質激素(ACTH)ELISA試劑盒規格：96T/48T

pxenOL,SATURATED飽和酚 (pH 6.6/7.9)生物技術級100MLCOLD  人核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腎小球內皮細胞說明書免疫血清羊抗人IgGshēng huà shì jì容量：RT1公斤  Humanierleukieceptorassociatedkinase,IRAKELISA試劑盒人白介素受體相關激酶(IRAK)ELISA試劑盒規格：96T/48T

基酸參標準NA  組織二酯酶1(PDE1)活性熒光定量檢測試劑盒10次

對胺蘭250克2～8°C  HumanIerleukin1α，IL-1αELISAKit人白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒規格：96T/48T

2-羥基 2-Hydroxy,99% 614-75-5 10G 通用試劑  人乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

錄化鑭七水合物 LcNTHcNUM CHLORIDq HqPTcHYDRcTq 1002-84-0  豬組胺(HIS)免疫試劑盒 Porcine Histamine ELISA Kit

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。