小鼠子宮頸組織提取物培養

小鼠子宮頸組織提取物【Cervix: Normal Mouse Cervix Derivatives】

子宮頸位于子宮下部，近似圓錐體。其上端與子宮體相連，下端深入。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠子宮頸組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運輸和保存；

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

操作要點；

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

G418溶液mg/ml ml3-(Hydroxymethyl)cyclopentanone1136811

Gentamicin solution 慶大霉素溶液5×1ml3-(Hydroxymethyl)cyclopentanol071254

Goldview染色液1ml3-(Hydroxymethyl)-nitro-(4-octylphenyl),4-butanediol8998229

Guanidine hydrochloride solution 6M 鹽酸胍溶液0ml3-(Bromomethyl)-cyclopropyl-(4'-fluorophenyl)quinoline15576

GUS染色試劑盒ml3-(Boc-Amino)piperidine99568
Decanedioic acid  111-20-6  中文名：  分子式：C10H18O4    組織MKK6激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol tetraacetate  340702-68-3  中文名：  分子式：C50H93NO9    humanphospholipidscramblase1,PLSCR1ELISAKit人0脂爬行酶1(PLSCR1)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Momor-cerebroside I  606125-07-9  中文名：  分子式：C48H93NO10    神經生長因子(NGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rengyol  93675-85-5  中文名：連翹環己醇  分子式：C8H16O3    Rat thrombomodulin (TM) ELISA Kit 大鼠血栓調節蛋白(TM)ELISA試劑盒

Cleroindicin D  189264-45-7  中文名：  分子式：C8H12O4    Humanoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISAKit 人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
撲熱息痛(標準品)  Paracetamol（Acetaminofen polvo）  質量規格：HPLC>99%,標準品 大鼠酪氨酸蛋白激酶JAK3(Jak3)試劑盒 Rat tyrosine-protein kinase JAK3,Jak3 ELISA kit

奧拉帕尼  Olaparib,AZD2281,KU0059436  質量規格：≥98%,選擇性的PARP1/2抑制劑 大鼠酪氨酸羥化酶(TH)試劑盒 Rat Tyrosine Hydroxylase,TH ELISA Kit

奎尼丁  Quinidine  質量規格：>98.0%,BR 大鼠類風濕因子(RF)試劑盒 Rat Rheumatoid Factor,RF ELISA Kit

單甘油酯/甘油一酯  Monolaurin/1-Lauroyl-rac-glycerol  質量規格：單酯含量大于40% 大鼠類5α還原酶1(SRD5A1)試劑盒 Rat Steroid 5-Alpha-Reductase 1,SRD5A1 ELISA Kit

甘油單油酸酯/單油酸甘油酯  Monoolein  質量規格：度≥50%,油狀液體 大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA檢測試劑盒RatGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit 96T/48T

ADP.Na2; 5'-二腺苷二鈉/腺苷-5'-二二鈉鹽  Adenosine-5'-diphosphate di salt(ADPna)  質量規格：>95.0%,BR 大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒 Rat Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit

ADP; 5'-二腺苷/腺苷-5'-二  Adenosine 5'-(trihydrogen diphosphate)/ADP  質量規格：>95.0%,BR 大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA檢測試劑盒RatGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor,GM-CSFELISAKit 96T/48T

沙格列汀/沙克列汀  Saxagliptin monohydrate  質量規格：>98%,BR,單水合物 大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)試劑盒 Rat Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit

更昔洛韋  Ganciclovir  質量規格：>98.5%,BR,可用于細胞培養 大鼠亮氨酰氨基肽酶(LAP)試劑盒 Rat Leucine aminopepridase,LAP ELISA Kit

更昔洛韋(標準品)  Ganciclovir  質量規格：HPLC>98.5%,標準品 大鼠細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA檢測試劑盒Ratlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit 96T/48T
小鼠子宮頸組織提取物培養球蛋白E(IgE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1,2-Cyclohexanedicarboximide  7506-66-3  中文名：  分子式：O2  度：98.0%  關鍵詞： 

球蛋白Aelisa試劑盒   球蛋白A試劑盒   規格型號：96T/48T   球蛋白A試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：球蛋白A試劑盒、球蛋白A elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  8-Hydroxyhyperforin 8,1-hemiacetal  中文名：  分子式：C35H52O5  度：%

球蛋白Aelisa試劑盒   球蛋白A試劑盒   規格型號：96T/48T   球蛋白A試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：球蛋白A試劑盒、球蛋白A elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic acid  中文名：喹方  分子式：C9H6INO4S  度：98.0%

球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒              8-Hydroxyodoroside A  中文名：  分子式：C30H46O8 

球蛋白A(IgA)ELISAKit     8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic acid  547-91-1  中文名：喹方  分子式：C9H6INO4S  度：98.0%  關鍵詞：