小鼠淋巴成纖維細(xì)胞提取物【Mouse lymphoid: Normal lymphoid Derivatives】 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞提取物是從小鼠原代淋巴成纖維細(xì)胞提取的,小鼠原代淋巴成纖維細(xì)胞從正常小鼠淋巴組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞提取物 | 英文名稱 | Mouse lymphoid: Normal lymphoid Derivatives | 貨號(hào) | EYX99163 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運(yùn)輸和保存: 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作要點(diǎn): 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 流感病毒N2型單重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒48N-Methyl,7-dioxo-sulfamoyl,6-dihydroH-thieno[2,3-b]thiopyran-yl]acetamide143 乙型流感病毒單重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒481,5-Pentanediol diacrylate3685 丙型流感病毒單重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒48Atracurium oxalate642288阿曲庫(kù)胺草酸鹽 甲型/乙型流感病毒雙重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒48Lurasidone3675147魯拉西酮 甲型H1N1/甲型流感病毒雙重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒481,2,3-Triacetyl-deoxy-D-ribose622113 Ketoconazole 65277-42-1 中文名:酮康唑 分子式:C26H28Cl2N4O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒 Jacaranone 60263-07-2 中文名: 分子式:C9H10O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 細(xì)胞毒活性; 果膠幼蟲誘導(dǎo)劑; 千里光屬; 雪葉蓮屬; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒 Ivermectin B1a 71827-03-7 中文名:依維菌素 分子式:C48H74O14 度:98.0% 小鼠糖化白蛋白(GA)ELISA試劑盒 Ivabradine hydrochloride 148849-67-6 中文名:鹽酸伊伐布雷定 分子式:C27H37ClN2O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒 Isosorbide dinitrate 87-33-2 中文名:硝酸異山梨酯 分子式:C6H8N2O8 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠糖皮質(zhì)激素 英文名稱: glucocoicoid 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: GC 新橙皮苷二氫查爾酮 HPLC≥98% 20mg HumanSerumamyloidP,SAPELISAKit 人血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 新穿心蓮內(nèi)酯 HPLC≥98% 20mg HumanSH2-coainingprotein,SHC/SLP-76ELISAKit 人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 新對(duì)葉百部堿 HPLC≥98% 20mg HumanSialicacid,SAELISAKit 人唾液酸(SA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 新苦味素 HPLC≥98% 20mg Humansolubleansferrieceptor,sTfRELISAKit人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 新魯斯可皂苷元 HPLC≥98% 20mg Humansolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAILELISAKit人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 新綠原酸 HPLC≥98% 20mg HumanSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 新芒果苷 HPLC≥98% 20mg HumanSomatostatin,SSELISAKit人生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 新藤黃酸 HPLC≥98% 20mg HumanSomelysin-1,ST1ELISAKit人基質(zhì)裂解素(ST1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 新西蘭牡荊苷 HPLC≥98% 10mg HumanSomelysin-3,ST3ELISAKit人基質(zhì)裂解素(ST3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 新知母皂苷BII HPLC≥98% 20mg Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISAKit 人山梨醇脫輕酶(SDH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞提取物堿性蛋白酶測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Tetracaine hydrochloride 中文名:鹽酸丁卡因 分子式:C15H25ClN2O2 堿性成纖維生長(zhǎng)因子 英文名稱: basic fibroblast growth factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: b-FGF 4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone 90-93-7 中文名:四乙基米氏酮 分子式:C21H28N2O 堿性0酸酶(AKP)檢測(cè) Acid phosphatase (ACP) detection Polypodine B 中文名:水龍骨甾酮B 分子式:C27H44O8 甲狀腺球蛋白抗體 英文名稱: Human Thyroglobulin Aibody 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TGAb Pefloxacin mesylate 70458-95-6 中文名:甲磺酸培氟沙星 分子式:C18H24FN3O6S 甲型流感H5N1 英文名稱: Influenza A H5N1(Avian Flu) HA 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: H5N1 HA Prosapogenin A 19057-67-1 中文名:薯蕷次皂苷A 分子式:C39H62O12 度:% 關(guān)鍵詞: 細(xì)胞毒活性; 麥冬; 螺甾烷; 甾苷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) |