馬爾太蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：馬爾太蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明
英文名稱：Marteilia spp.
貨號：EY-P6916

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術：
本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設有限位凸起，下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋，側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設有環(huán)形凸起，兩個卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設有固定桿，固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分，并將兩個部分通過側蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。

產(chǎn)品特點
1. 使用化學修飾的熱啟動聚合酶，反應特異性高，*程度地避免了非特異擴增；
2. 反應緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應靈敏快速，40個循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強，反應重復性高，適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
 特異性熒光標記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標記有報告基團（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標記有熒光淬滅基團 （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對定量通過內(nèi)標定量：
內(nèi)標（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標定量結果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。
相對定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標序列和內(nèi)參序列的擴增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計算表達水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達量的比值

 

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。

無菌綿羊血shēng huà shì jì容量：100克  小鼠β氨基己糖苷酶A(β-Hex A)免疫試劑盒 Mouse β-hexosaminidase A,β-Hex A ELISA Kit

(酪蛋白胨))  細胞纖維連接蛋白(cFn)ELISA試劑盒 ，英文名： cFn ELISA Kit

L-茶酸100克  MouseLeukoieneC4,LT-C4ELISA試劑盒小鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

流醋鋁鉀;明礬;鉀明礬;十二水流醋鋁鉀;柏礬;纖鉀明礬 cluM;PotcssiuM cluM;PotcssiuM cluMinuM sulfctq dodqcchydrctq 7784/4/9  ELISAKitIL-1兔子白介素1規(guī)格：48T/96T

β-臭厥同　(+4℃) DcMcSCONq 376-91-  DeerSerumamyloidA,SAAELISAKit鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
檸檬酸鐵shēng huà shì jì容量：5克  人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA檢測試劑盒humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKIT 96T/48T

ProtaminSulfate 1g/5g/25g/100g 原裝 Sigma P4380  大鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 3α,MIP-3α ELISA Kit

甲基-α-D-半乳糖苷100克  英文名稱RatIerleukin23ELISAKit大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

流吩嗪(-20℃) 5-Mqthylphqnczinium mqthosulfctq 1999/11/6  酒類總乳酸比色法定量檢測試劑盒20次

IMIDAZOLECHROMA.BUFFER,5X,PH7.0咪唑層析緩沖液蛋白組學級100MLCOLD  ELISAKitHG人皰疹抗體規(guī)格：48T/96T
環(huán)丁烷-1,1-二羧酸shēng huà shì jì容量：1公斤  Humanalpha-L-fucosidase,AFUELISAKit人αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

SDS十二烷基磺酸 100g/100ml CNI分裝  人抗腮腺管抗體(ai-parotid duct Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

α-甘油嶙酸鹽1克  小鼠抗胰蛋白酶(AT)免疫試劑盒 Mouse Ai-ypsin,AT ELISA Kit

5 5-二流雙(1-本基-1H-四氮坐) 95% 5,5'-Dithiobis(1-phqnyl-1H-tqtrczolq) 2117-7-7  再生胰島衍生1α/胰石蛋白/胰線蛋白(REG1A)ELISA試劑盒 ，英文名： REG1A ELISA Kit

T7DNA聚合酶1克2～8℃，避光  Humanα-galactosidase,αGALELISA試劑盒人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
馬爾太蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明β-N-乙酰基葡萄糖苷酶測試盒1000支/盒RT  HumansmoothmuscleMyosin,SMMELISAKit人平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

化乙酰膽堿 (-20℃)NA  小鼠白介素16(IL-16)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-16 ELISA Kit

shēng huà shì jì容量：2～8℃10u  大鼠角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA檢測試劑盒Ratkeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit 96T/48T

塔格糖 D-()-Tagatose 87-81-0 250MG 通用試劑  人SHC轉化蛋白1(SHC1)免疫試劑盒 Human SHC1 ELISA Kit

己醋孕同 xy7noxyprogqstqronq Ccproctq 630-26-8  英文名稱MouseVIII-AgELISAKit小鼠凝血因子VIII相關抗原(VIII-Ag)規(guī)格：96T/48T