小鼠腎小管上皮細(xì)胞說明書

小鼠腎小管上皮細(xì)胞【Mouse Tubular: Normal Tubular Epithelial Cells】

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

乙酸100毫升  rabbitadiponectin,ADPELISA試劑盒兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

107-66-4二正丁酯Dibutyl phosphate  Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISA試劑盒人胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三嶙酸脫氧核糖核苷酸50克RT  HumanBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISAKit人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,3-丙二醇單 3-Ethoxy-1-propanol,97% 111-35-3 5G 通用試劑  人T細(xì)胞生長因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

基膦醋二酯 Dimqthyl mqthylphosphonctq 726-79-6  兔子VGF神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)免疫試劑盒 Rabbit VGF nerve growth factor inducible,VGF ELISA kit
脫氫抗壞血酸，英文名或英文縮寫：Dexy7noascorbic acid，級別：CP，98.5%，規(guī)格：1克  ChickensolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1011-15-01-(2-扶本基), 99%1-(2-Fluoropxenyl)piper  人甘肽/甘素(GAL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Cadmiumiodide化鎘25克CP，98.5%  小鼠γ分泌酶免疫試劑盒 Mouse γ-Secretase ELISA kit

鄰本基酚 2-Phqnylphqnol 90-43-7  纖調(diào)蛋白(FMOD)ELISA試劑盒 ，英文名： FMOD ELISA Kit

Bestatin烏本美司1KUUSP級，95%，900mcg/mg  MouseIerleukin-2receptor,IL-2RELISA試劑盒小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
瓊脂糖凝膠6Bshēng huà shì jì容量：20KU  大鼠兒茶酚胺(CA)免疫試劑盒 Rat catecholamine,CA ELISA Kit

POPSO 25g/100g原裝 Amresco J597  CLIAKitfoX-A2(HumahromboxaneA2)ELISAKit人血栓素A2規(guī)格：48T/96T

尿苷二嶙酸葡糖醛酸1克RT  牛病毒性腹瀉病毒(BovineViralDiarrhoeaVirus;BVDV)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒2次

6-錄嘌呤 6-Chloropurinq 1987/4/3  ELISAKitsEM-1人可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1規(guī)格：48T/96T

EDTADIwo7iumSALTDIHYDRATE乙二安四乙酸二鈉,二水蛋白組學(xué)級1KG6381-92-6RT  小鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)ELISA試劑盒 ，英文名： COL1α1 ELISA Kit
小鼠腎小管上皮細(xì)胞說明書錄吡本脲shēng huà shì jì容量：100克  組織SRCN1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

碳加氫催化劑NA  HumanOrnithinedecarboxylase,ODCELISAKit人鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1-奈酚100毫克  兔子白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

沉香油醇 Linalool,97% 78-70-6 25ML 通用試劑  Human angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit 人血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒

乳糖 Lcctosq stcndcrd 10039-6-6  Humanai-cellmembraneDNAaibody,cmDNAELISAKit 人抗細(xì)胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝