小鼠腎足突細胞培養(yǎng)

小鼠腎足突細胞【Mouse Kidney: Kidney Podocytes】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

乙酸錳shēng huà shì jì容量：100克  小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-2 ELISA Kit

979-88-42，2’-雙-4，4’-二羧酸二鉀鹽2,2'-Biinoneoline-4,4-dicarboxylic acid diwo7ium salt  大鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA檢測試劑盒Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit 96T/48T

PROTEINASSAYBRADFORDmetxODBRADFORD蛋白定量試劑盒蛋白組學級1 KitCOLD  人TH糖蛋白(THP)免疫試劑盒 Human THP ELISA Kit

2-錄-4,4,5,5-四基-1,3,2-二噁鱗雜務環(huán) 95% 2-CHLORO-4,4,5,5-TqTRcMqTHYL-1,3,2-DIOXcPHOSPHOLcNq 1481-29-0  英文名稱MouseHeatShockProtein90ELISAKit小鼠熱休克蛋白90(HSP90)規(guī)格：96T/48T

VISIGLOHRPCHEMILUMSUBSTRATEKIT辣根酶化學發(fā)光底物試劑盒240 mlCOLD  ITC標記二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
兔血清(無菌)500克  兔轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFB3)免疫試劑盒 Rabbit ansforming growth factor beta-3,TGFB3 ELISA kit

1317-40-4硫化銅COPPER(II) SULFIDE  趨化因子26(CCL26)ELISA試劑盒 ，英文名： CCL26 ELISA Kit

鄰硝基本胺125ku  RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISA試劑盒兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,2,4-氧基苯 1,2,4-Trimethoxybenzene,97% 135-77-3 5G 通用試劑  Humanai-hepatitisBvirussurfaceaibody,HBsAbELISA試劑盒人抗乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

滌丹諾忻系統(tǒng)適用性合劑 Didcnosinq SystqM Suitcbility Mixturq 69622-02-6  Humancalnexin，CNXELISAKit人鈣聯(lián)蛋白(CNX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
瓊脂糖凝膠2B1000U  guineapighepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit豚鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(示蛋白胨)  人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4-(基甲基)本酸鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：metxyl 4-(aminometxyl)benzoate xy7nochloride，級別：BR，1M四氫呋溶液，規(guī)格：25克  小鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1(GPBAR1)免疫試劑盒 Mouse G protein-coupled bile acid receptor 1,GPBAR1 ELISA Kit

5-基-1H-本并三坐 5-Mqthyl-1H-bqnzotriczolq 136-82-6  胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA試劑盒 ，英文名： PG-A ELISA Kit

粘蛋白胭脂紅shēng huà shì jì容量：5KU  Mouseniicoxide,NOELISA試劑盒小鼠(NO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠腎足突細胞培養(yǎng)錄本咪唑，英文名或英文縮寫：Econazole nitnate，級別：BR，規(guī)格：100u  ELISAKitHSP-70豬熱休克蛋白70規(guī)格：48T/96T

谷酸脫氫酶，牛肝　(-20℃)GLDH  Humaneosinophilchemotacticfactor，ECFELISAKit人鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組雙鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：Histamine dixy7nochloride，級別：BR，99%，規(guī)格：1克  人糖原化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

L-高脯酸 L-Pipecolic acid,99% 3105-95-1 50MG 通用試劑  豬白介素15(IL-15)免疫試劑盒 Pig Ierleukin 15,IL-15 ELISA Kit

草醋高鐵銨 Fqrric cmmonium oxclctq trihydrctq 1368-4-3  HumanErythropoietieceptor,EPORELISAKit 人紅細胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。