Primarker™人子宮成纖維細胞鑒定試劑盒

Primarker™人子宮成纖維細胞鑒定試劑盒

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運輸和保存；

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

操作要點；

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

真菌瓊脂培養基shēng huà shì jì容量：RT，避光25克  人血小板生成素(TPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

100-37-8二乙基乙醇≥99.5%Dietxylaminoethanol  豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒 Pig serum amyloid A,SAA ELISA Kit

DTT(DL-DITHIOTHREITOL)二硫蘇糖醇蛋白組學級5G27565-41-9Frozen  Humanplateletgrowthfactor,PGFELISAKit 人血小板生長因子(PGF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

鄰錄錄芐 2-Chlorobqnzyl chloridq 611-19-8  HumanLeukoieneC4,LT-C4ELISA試劑盒人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒規格：96T/48T

TRYPSININHIBITOR,SOYBEAN胰蛋白酶抑制劑,大豆蛋白組學級10G9035-81-8Frozen  組織前列腺型酸性酶(PACP)活性比色法定量檢測試劑盒20次
溴紫10ku保存：-20℃  rabbitImmunoglobulinG,IgGELISAKit 免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

(布里杰-35)  CLIAKitforBAFF-R(HumanBcellactivationfactorrfromthetumornecrosisfactorfamilyreceptor)ELISAKit人B細胞活化因子受體規格：48T/96T

鄰本二羧酸-二-C8-10支鏈烷基酯，英文名或英文縮寫：DINP，級別：AR，98%，規格：25克  線蟲補骨脂素(4-imethylpsoralen)誘導突變試劑盒10次

碳醋輕銨 cmmonium biccronctq 1066-33-7  Rabbitcatecholamine,CAELISAKit兔兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

鱗醋二正丁酯 Dibutyl phosphctq 107-66-4  豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒 ，英文名： IgG ELISA Kit
蘇木素，英文名或英文縮寫：Hematoxylin，級別：超純，98%，規格：10克  Ratbrainnaiureticpeptide,BNPELISA試劑盒大鼠腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

12027-38-2硅鎢酸(陰涼)SILICOTUNGSTIC ACID HYDRATE  小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

熒光素酶(細菌)，英文名或英文縮寫：Luciferase from Bacteria，級別：精制級，40u/mg，規格：5克  Rat cytochrome P450 (CYP450) ELISA Kit 大鼠細胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒

三鈉鹽三(3-磺酰苯... TPPTS,≥95.0% 63995-70-0 250MG 通用試劑  Human8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit 人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

拂橡膠 III Fluoro gum III  HumanComplemefragme3b,C3bELISA試劑盒人補體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒規格：96T/48T
Primarker™人子宮成纖維細胞鑒定試劑盒價格葡萄酸銅，英文名或英文縮寫：Cupric tartrate trihydrate，級別：CP，98%，規格：500克  HumanHeatShockProtein90,HSP-90ELISA試劑盒人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Amylopectin 1g/5g/10g/25g原裝 Sigma A8515  組織副傷寒沙門氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定量PCR擴增檢測試劑盒20次

ISOPROPYLALCOHOL異生物技術級20L67-63-0RT  HumanMaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit人基質金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒規格：96T/48T

銻標準溶液 cntimony 7440-36-0  人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Pancreatin胰酵25克10萬u/g  Human acetylcholinesterase (AChE) ELISA Kit 人乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒