小鼠卵巢上皮細(xì)胞提取物【Mouse Ovaries: Normal Ovaries Derivatives】 小鼠卵巢上皮細(xì)胞提取物是從小鼠原代卵巢上皮細(xì)胞提取的,小鼠原代卵巢上皮細(xì)胞從正常小鼠卵巢組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱(chēng) | 小鼠卵巢上皮細(xì)胞提取物價(jià)格 | 英文名稱(chēng) | Mouse Ovaries: Normal Ovaries Derivatives | 貨號(hào) | EYX99168 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運(yùn)輸和保存: 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作要點(diǎn): 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 藍(lán)色方形冷凍冰盒 24×1.5ml+14×0.5ml 元trans,trans-Bis(4-fluorobenzal)acetone5336反,反-雙(4-亞甲基) 兩色精密pH試紙 4.5.00條/盒 Bis(4-hydroxy,5-dimethylphenyl) sulfone1328雙(4-羥基,5-二甲苯基)砜 酶標(biāo)板塊/包 4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone3四乙基米氏酮 滅菌指示帶米/卷3,3'-Sulfonyldianiline59913,3'-二氨基二苯砜 尼龍膜1,4-Bis[2-(4-methyl-phenyloxazolyl)]benzene7371,4-二[2-(4-甲基-苯基惡唑基)]苯 Isodiospyrin 20175-84-2 中文名: 分子式:C22H14O6 組織NLK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次 Ethyl (1-hydroxy-4-oxocyclohexa-2,5-dien-1-yl)acetate 60263-06-1 中文名: 分子式:C10H12O4 Humanphosphatidylserine,PSELISAKit人0脂酰絲氨酸(PS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 16-Acetoxy-7-O-acetylhorminone 269742-39-4 中文名: 分子式:C24H32O7 兔子腦素/腦尿肽(BNP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 α-Tocopherolquinone 7559/4/8 中文名: 分子式:C29H50O3 Human adeno-associated virus (AAV) ELISA Kit 人腺相關(guān)病毒(AAV)ELISA試劑盒 Horminone 21887-01-4 中文名:7α-羥基羅列酮 分子式:C20H28O4 HumanmembraneIgA,mIgAELISAKit 人表面膜球蛋白A(mIgA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 硝酸鈀 Palladium (II) nitrate dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:BR 小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 鈀粉(>99%,BR) Palladium, powder 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousecardioophln1,CT-1ELISAKit 96T/48T 乙酸副品紅(>85%,BS) Pararosaniline acetate 質(zhì)量規(guī)格:>85%,BS 小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT1)ELISA試劑盒 ,英文名: CT1 ELISA Kit 鈣激活鉀通道阻斷劑來(lái)源于覃青霉 Paxilline*, from Penicillium paxilli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC 小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒 ,英文名: CT-1 ELISA Kit 青霉酸(>98% (HPLC),BC) Penicillic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98% (HPLC),BC 小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4 ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 青霉震顫素(>95%(HPLC),BC) Penitrem A from Penicillium palitans 質(zhì)量規(guī)格:>95%(HPLC),BC 小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4ELISA檢測(cè)試劑盒Mousecardiacanscriptionfactor-GATA4ELISAKit 96T/48T β-D-半乳糖五乙酸酯(>98%,BR) Pentaacetyl-β-D-galactopyranose 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠心肽(ANP)ELISA試劑盒 ,英文名: ANP ELISA Kit 人造沸石 Permutit 質(zhì)量規(guī)格:Tech Grade 小鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP3)ELISA試劑盒 ,英文名: FABP3 ELISA Kit 酚肽二四鈉(>96%,BC) Phenolphthalein diphosphate tetra salt 質(zhì)量規(guī)格:>96%,BC 小鼠心營(yíng)養(yǎng)素樣細(xì)胞因子1(CLCF1)ELISA試劑盒 ,英文名: CLCF1 ELISA Kit 吩噻嗪(>98%,BR) Phenothiazine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠鋅結(jié)合α2-糖蛋白1(αZGP1)ELISA試劑盒 ,英文名: αZGP1 ELISA Kit 小鼠卵巢上皮細(xì)胞提取物價(jià)格抗利尿激素 (AVP) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Oxiracetam 62613-82-5 中文名:奧拉西坦 分子式:C6H10N2O3 抗蛋白酶 250mg Valnemulin hydrochloride 133868-46-9 中文名:鹽酸沃尼妙林 分子式:C31H53ClN2O5S 度:98.0% 抗Livin 抗體 英文名稱(chēng): Ailivin aibody 英文縮寫(xiě): ALA 規(guī)格: 48T/96T Valsartan 137862-53-4 中文名:纈沙坦 分子式:C24H29N5O3 荊豆凝集素elisa試劑盒 荊豆凝集素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 荊豆凝集素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:荊豆凝集素試劑盒、荊豆凝集素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 6-Aminoindole 中文名:6-氨基吲哚 分子式:C8H8N2 金黃色葡萄球菌(SA)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T Topiramate 97240-79-4 中文名:托吡酯 分子式:C12H21NO8S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: |