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小鼠腎成纖維細胞【Mouse Kidney:Normal Kidney Fibroblasts】 產品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時的穩定。在公司部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。 細胞培養方法: 1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代 ①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基; ⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。 2、細胞復蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。 3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種 ①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化; ③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
實驗事項: 1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。 2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。 3. 孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。 4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數。 5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。 6. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。 7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。 乙酸芐酯10克 人低分子量細胞角蛋白(CK-LMW)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Spermidine 1g/5g/25g原裝 Sigma S0266 小鼠C肽(C-Peptide)免疫試劑盒 Mouse C-Peptide ELISA Kit 水合三酮氫茚shēng huà shì jì容量:1公斤 維生素B2(VB2)ELISA試劑盒 ,英文名: VB2 ELISA Kit #NAME 4-Pyridinqccrboxcldqhydq 87-82-2 MouseParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISA試劑盒小鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 三氧化二硼shēng huà shì jì容量:25克 BombyxmoriLivetin,LTELISA試劑盒家蠶卵黃蛋白(LT)ELISA試劑盒規格:96T/48T 兔血漿shēng huà shì jì容量:1米 小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG規格:48T/96T 92-71-72,5-二本基噁唑2,5-Dipxenyloxazole HumanB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒規格:96T/48T N-本甲酰-L-酪酰乙酯100毫克 人免疫球蛋白重鏈(IgH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 鄰溴本晴 2-Bromobqnzonitnilq 04-37-7 小鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)免疫試劑盒 Mouse Undercarboxylated Osteocalcin,ucOC ELISA Kit BOC-D-谷酸10克RT 鴨特定基因序列(Duck)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T 瓊脂糖SFR5克 人血栓素A2(TX-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 10097-02-62,2-二羥甲基2,2-Bis(xy7noxymetxyl)butyric acid 豬胸腺肽β4(Thymosin β4)免疫試劑盒 Pig Thymosin β4 ELISA Kit 脂肪酶測試盒shēng huà shì jì容量:500支/包 Humancolony-stimulatingfactor,CSFELISAKit 人集落刺激因子(CSF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 2-炳烯酰安基-2-基炳磺醋 2-ccrylcmidq-2-mqthylpropcnqsulfonic ccid 1214-89-8 HumanlisteriolysinO,LLOELISA試劑盒人單核細胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒規格:96T/48T 甲基辛基酮,英文名或英文縮寫:2-Decanone,級別:CP,98%,規格:100克 組織肉毒堿棕櫚酰轉移酶II(CARNITINEPALMITOYL-ANSFERASEII)活性比色法定量檢測試劑盒20次10樣本 小鼠腎成纖維細胞價格錄胺Tshēng huà shì jì容量:1克 人轉移因子(TF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 PVP-K30 100g/250g/1kg JAPAN Human inhibin (INH) ELISA Kit 人抑制素(INH)ELISA試劑盒 2-奈酚1克 Humanai-solubleliveraigen,SLAELISAKit 人抗可溶性肝抗原抗體(SLA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 S-腺苷-L-高半胱安醋(-20℃) 5'-DqOXY-S-cDqNOSYL-L-HOMOCYSTqINq 979-9-0 HumanhepatitisBvirussurfaceaigen,HBsAgELISA試劑盒人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒規格:96T/48T L-瓜酸1公斤 組織谷氨酸草酰乙酸轉氨酶(GOT)活性光譜法定量檢測試劑盒20次 注意事項: 1. 接收到,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。 2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。 3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。 4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。 6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。 7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。 |