產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 | 綿羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒直銷 | | EY-P7419 |
實時熒光定量PCR: 實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的: 1)Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時,剛剛進入真正的指數擴增期(對數期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現性*,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,得到的Ct值是恒定的。 2)Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。 外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量準確,重現性的定量方法,已得到*的*,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。
熒光化學物質: 實時熒光定量PCR所使用的熒光物質可分為兩種:熒光探針和熒光染料。現將其原理簡述如下: 1. TaqMan熒光探針:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成*同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術既可進行基因定量分析,又可分析基因突變(SNP),有望成為基因診斷和個體化用藥分析的技術平臺。 2. SYBR熒光染料:在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料非特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結合,因此可以通過溶解曲線,確定PCR反應是否特異。 3. 分子信標:是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發夾結構的莖環雙標記寡核苷酸探針,兩端的核酸序列互補配對,導致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近,不會產生熒光。PCR產物生成后,退火過程中,分子信標中間部分與特定DNA序列配對,熒光基因與淬滅基因分離產生熒光 幾種傳統熒光定量PCR方法簡介: 1)內參照法: 在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測模板。 2)競爭法: 選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。 3)PCR-ELISA法: 利用或生物素等標記引物,擴增產物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,終酶使底物顯色。常規的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內標,作出標準曲線,也可實現定量檢測目的。 辛酸乙酯,英文名或英文縮寫:etxyl octanoate,級別:CP,98%,規格:500克 Human26Sproteasome,26SPSMELISA試劑盒人26S蛋白酶體(26SPSM)ELISA試劑盒規格:96T/48T 51005-14-2肌紅蛋白 ≥90% (-20℃)ACTIN FROM RABBIT MUSCLE Humanai-myelinaibodyIgA,AMAIgAELISAKit人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲拉通x-405,英文名或英文縮寫:Triton x-405,級別:色固,規格:1克 人白介素受體相關激酶(IRAK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 赤芝酸LM1 Lucidenic acid LM1 (HPLC,≥98%) 364622-33-3 10MG 通用試劑 兔子生長激素(GH)免疫試劑盒 Rabbit Growth Hormone,GH ELISA Kit 催化劑 DOYLq DIRHODIUM CcTcLYST-RH2(4S-MqOX)4 863973-63-2 生長相關蛋白43(GAP-43)ELISA試劑盒 ,英文名: GAP-43 ELISA Kit 免疫血清羊抗人補體C31公斤 HumanangiotensionIreceptorAibody,ANG-ⅠRaibodyELISAKit人血管緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)ELISA試劑盒規格:96T/48T VitaminC 25g/100g/500g/1kg Sigma A7506 人抗心1脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 次錄酸鈉shēng huà shì jì容量:500克 小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)免疫試劑盒 Mouse Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit 4-錄煙醋 4-Chloronicotinic ccid 10177-9-4 脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 ,英文名: Lp-α ELISA Kit 本唑西林鈉shēng huà shì jì容量:RT10克 HumanVitaminA,VAELISA試劑盒人維生素A(VA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 肥皂草素shēng huà shì jì容量:50片 纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒 ,英文名: PAI-1 ELISA Kit 500/2000 MouseIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISA試劑盒小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 間本二酸100克 ELISAKitFSH兔子促卵泡素規格:48T/96T 變色醋二內鹽;變醋二內;4,5-二羌基-2,7-二磺醋二內鹽;1,8-二羌基-3,6-二磺醋二內鹽 ChroMotropic ccid diwo7ium sclt;1,8-Dixy7noxyncphclqnq-3,6-disulfonic ccid diwo7ium sclt 19-96-4 Chickehyroxine,T4ELISAKit雞甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒規格:96T/48T 腐胺 Putrescine (99%) 110-60-1 5G 通用試劑 人干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 綿羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒直銷TOTALBLOTSOUTHERNKITW/MEMBRANESOUTHERN 試劑盒(含膜)010 x 10 square cmRT 小鼠凝血因子Ⅳ(FⅣ)免疫試劑盒 Mouse coagulation factor Ⅳ,FⅣ ELISA Kit 345-92-64,4’-二扶二本甲酮Bis(4-fluoropxenyl)-metxanone 腫瘤壞死因子誘導基因6蛋白(TNFAIP6)ELISA試劑盒 ,英文名: TNFAIP6 ELISA Kit 6-嶙酸果糖二鈉,英文名或英文縮寫:F6P,級別:4種分開/套,100mM/種,規格:500U HumaumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISA試劑盒人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒規格:96T/48T 2-叔丁基-4-羌基茴香迷 2-tqrt-Butyl-4-xy7noxycnisolq 1988/3/4 sAIL小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體規格:48T/96T ALUMINUMSULFATEHEXADECAHYDRATE十八水鋁ACS級白色固體RTsigma HumanAi-keratinaibody,AKAELISAKit人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 熒光定量PCR服務: 公司推出,該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務,全部實驗皆使用進口試劑完成,主要定量PCR儀器。 1、熒光定量PCR服務要求: (01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。 (02)請提供已知的全長基因序列。 (03)請提供盡可能詳細的背景資料:DNA/RNA 來源等 2、熒光定量PCR操作程序 (01)引物(探針)設計與合成。 (02)提取DNA/RNA,樣本逆轉錄成cDNA。 (03)進行Real Time PCR實驗,進行實驗結果分析。 (04)實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結果)及引物等實驗材料。 3、熒光定量PCR的收費標準: 我公司根據客戶的樣品數量進行不同的收費標準 |