小鼠小梁網細胞提取物培養

小鼠小梁網細胞提取物【Mouse Eye：Normal Trabecular Meshwork Cells Derivatives】

小鼠小梁網細胞提取物是從小鼠原代小梁網細胞提取的，小鼠原代小梁網細胞從正常小鼠眼組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

克倫特羅 ELISA試劑盒96TN-(2-Methoxyphenyl)acetamide9362-乙酰

孔雀石綠 ELISA試劑盒96TN-(2-Hydroxyethyl)-(4-nitrophenyl)propylamine16349

泰樂菌素 ELISA試劑盒96TN-(2,6-Diphenylmethyl)-piperazine acetylamine52941

硝基咪唑 ELISA試劑盒96TN-(2,6-Dimethylphenyl)-piperidinecarboxamide2726

新霉素 ELISA試劑盒96TN-(2,3-Epoxypropyl)phthalimide1615967
Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit 人β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  1-Cyclopropyl-6,7-difluoro-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid ethyl ester  112811-71-9  中文名：  分子式：C16H15F2NO4  度：98.0%  關鍵詞： 

Humanypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  1,6-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methanol  中文名：  分子式：C9H16O3  度：98.0%

Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit 人可溶性內皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  1,2-O-Isopropylidene-β-D-fructopyranose  66900-93-4  中文名：  分子式：C9H16O6  度：98.5%  關鍵詞：  中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

HumansolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 人可溶性白細胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  1-Amino-2-methylanthraquinone  中文名：1-氨基-2-甲基蒽醌  分子式：C15H11NO2  度：98.0%

Humansalivaryductaoaibody,SDAELISAKit 人抗唾液腺導管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  (+)-Noe's reagent  中文名：(+)-核歐沃豪斯效應試劑  分子式：C24H38O3  度：98.0%
腺苷-5’-二一鈉  ADP.Na  質量規格：>98%,BR 小鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅧAg ELISA Kit

D-纖維二糖  D-(+)-Cellobiose  質量規格：>98%,BR 小鼠淀粉樣蛋白β1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 ，英文名： Aβ1-40 ELISA Kit

胞苷-5'-二二鈉鹽(CDP.Na2)  Cytidine-5'-diphosphate di salt  質量規格：>98%,BR 小鼠淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒 ，英文名： Aβ1-42 ELISA Kit

胞苷-5'-單二鈉鹽(CMP.Na2)  Cytidine-5'-monophosphate Di Salt  質量規格：>98%,BR 小鼠淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1(APLP1)ELISA試劑盒 ，英文名： APLP1 ELISA Kit

TFA-aa-U  TFA-aa-U  質量規格：>98%,BR 小鼠淀粉樣前體蛋白(APP)ELISA試劑盒 ，英文名： APP ELISA Kit

TFA-aa-dU  TFA-aa-dU  質量規格：>98%,BR 小鼠凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)ELISA試劑盒 ，英文名： APAF1 ELISA Kit

5-尿苷  5-Iodo-Uridine  質量規格：>99%,BR 小鼠凋亡相關因子(FAS)ELISA試劑盒 ，英文名： FAS ELISA Kit

5--2'-脫氧尿苷(苷)  5-Iodo-deoxyuridine  質量規格：>98%,BR 小鼠凋亡相關因子(Fas/Apo-1/CD95)ELISA試劑盒 ，英文名： Fas/Apo-1/CD95 ELISA Kit

5--2'-脫氧胞苷  5-Iodo-deoxycytidine  質量規格：>98%,BR 小鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2'-甲氧基尿苷  2’-OMe Uridine  質量規格：>98%,BR 小鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA檢測試劑盒MouseFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit 96T/48T
小鼠小梁網細胞提取物培養內皮生長因子 165(VEGF165)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside  中文名：  分子式：C56H90O19 

內皮生長因子 (VEGF)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  Androstanolone 17-benzoate  中文名：雄諾龍苯甲酸酯  分子式：C26H34O3  度：98.0%

緊張素轉化酶   英文名稱：   Angiotensin Conveing Enzyme   規格：   48T/96T   英文縮寫：   ACE  Otophylloside B  中文名：青陽參苷B  分子式：C49H78O16  度：97.0%

緊張素I(素、AngI)   96T/48T  Ornidazole  中文名：奧硝唑  分子式：C7H10ClN3O3  度：98.0%

緊張素Ⅱ一型受體抗原   英文名稱：   Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen   英文縮寫：   AT1R   規格：   48T/96T  Ophiopogonin D  中文名：麥冬皂苷D  分子式：C44H70O16  度：%