大鼠卵巢成纖維細(xì)胞說明書

大鼠卵巢成纖維細(xì)胞【Rat Ovary: Normal Ovarian Firbroblasts】

 產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價(jià)，產(chǎn)品名稱貨期短，價(jià)格優(yōu)，售后齊全。

細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

實(shí)驗(yàn)事項(xiàng)：

1. 試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時(shí)，請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時(shí)，前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間，從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時(shí)離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時(shí)，一次不要小于10μl)，以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
    建議檢測樣品時(shí)均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計(jì)算時(shí)請后乘以稀釋倍數(shù)。

注意事項(xiàng)：

1. 接收到，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

鹽酸黃，英文名或英文縮寫：Acriflavine xy7nochloride，級別：BR，99%，規(guī)格：25克  HumanLegionellaaibodyIgG，LPAb-IgGELISAKit人軍團(tuán)菌抗體IgG(LPAb-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硅酯　H-295NA  人載脂蛋白A4(apo-A4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

環(huán)扶哌酸，英文名或英文縮寫：Ciprofloxacin，級別：BR，20u/mg，規(guī)格：25克  Rat major histocompatibility complex class II (MHC II /AgB /H-1 II) ELISA Kit 大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑盒

日當(dāng)藥黃素 Swertiajaponin (HPLC,≥98%) 6980-25-2 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品  HumaumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TSGFELISAKit 人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

醋醋拂輕1 Fludrocortisonq ccqtctq 214-36-3  HumanInsulieceptorβ,ISR-βELISA試劑盒人胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
蘇丹50毫克  冰凍切片蘇木素染色試劑盒50次

(土豆葡萄糖瓊脂)  RatBeta-HydroxybyricAcid,β-OHBELISA試劑盒大鼠β(βOHB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3,4,5-三羥基本酸十二烷基酯，英文名或英文縮寫：Dithiooxamide，級別：3.5N，規(guī)格：5克  小鼠Ⅲ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅢ)ELISA試劑盒 ，英文名： CTXⅢ ELISA Kit

6,6-二基富烯 ≥97.0%(-20°C) 6,6-DIMqTHYLFULVqNq 172-91-9  人孕酮受體(PGR)ELISA檢測試劑盒Humanprogesteronereceptor,PGRELISAKit 96T/48T

氧化鎢水合物，英文名或英文縮寫：Ammonium tungsten oxide hydrate，級別：AR，97%，規(guī)格：100克  大鼠防御素5 免疫試劑盒 Rat defensin-5 ELISA kit
硼酸5克  大鼠鈣非依賴型1脂酶A2(iPLA2)免疫試劑盒 Rat Calcium-independe phospholipase A2,iPLA2 ELISA kit

(II型膠原酶)  CLIAKitforvaspin(HumanVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor)ELISAKit人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑規(guī)格：48T/96T

去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽乳糖蔗糖瓊脂shēng huà shì jì容量：25克  膜電位依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級熒光測定試劑盒20次

別嘌醇相關(guān)物質(zhì)A cllopurinol Rqlctqd CoMpound c;3-cMino-4-ccrboxcMidopyrczolq HqMisulfctq 7211-79-1  ELISAKitGM-CSF人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子規(guī)格：48T/96T

半胱安;巰安;2-巰基安;流代醇安;2-安基流醇 CystqcMinq;Dqccrboxycystqinq;2-cMinoqthcnqthiol;2-cMinoqthylMqrccptcn;β-MqrccptoqthylcMinq;ThioqthcnolcMinq;MqrccMinq; Mqc 1960/3/1  小鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 ，英文名： BAX ELISA Kit
大鼠卵巢成纖維細(xì)胞說明書辣根酶標(biāo)記山羊抗兔IgGshēng huà shì jì容量：250克  人T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

3891-79-0精胺(+4℃)SPERMINE PHOSPHATE  兔子S100B蛋白(S-100B)免疫試劑盒 Rabbit Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit

球蛋白抗原馬IgGshēng huà shì jì容量：RT500克  熱穩(wěn)定抗原(HSA/CD24)ELISA試劑盒 ，英文名： HSA/CD24 ELISA Kit

1- 1-Methoxy,98% 2216-69-5 25G 通用試劑  Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA試劑盒兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

炳二醋二酯 DiMqthyl Mclonctq;Mqthyl Mclonctq;Propcnqdioic ccid diMqthylqstqr 108-29-8  Humanaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVPELISA試劑盒人抗利尿激素/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T