冷凍保存細(xì)胞之方法: 小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞系;TPA 2-14培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 產(chǎn)品描述: 細(xì)胞名稱 小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞系;TPA 2-14培養(yǎng) 形態(tài)特性淋巴母細(xì)胞樣 生長(zhǎng)特性半貼壁生長(zhǎng) 特征特性該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)10%FBS 傳代方法1:3傳代,3-4天傳1次 傳代情況C9 凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測(cè)陰性 STR 同工酶 染色體
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞系;TPA 2-14培養(yǎng)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。 二.細(xì)胞處理: 1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 注意事項(xiàng): ?1.一般客戶拿到小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞系;TPA 2-14培養(yǎng)后,應(yīng)該注意什么? 客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。 收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。 細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些? (1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā); (2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā); (5)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā); (6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā); (7)視具體情況而定。 鹽增菌液(SF)250g用于增殖標(biāo)本中的沙門氏菌 GC瓊脂 250g 用途:用于淋球菌的分離培養(yǎng)。 氯三糖鐵 NaCl Triple Sugar Iron Agar 250 用于副溶血性弧菌的生化反應(yīng)篩選(SN標(biāo)準(zhǔn)) 5000ml/瓶incubationmedia5000ml/瓶 BoltonBrothSupplement 小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞系;TPA 2-14培養(yǎng)*CAE-AbHuman抗人胸腺瘤抗體規(guī)格:48T *ABCA1(human)人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A1規(guī)格:48T *sTNFAlpha-RI(humen)人可溶性腫瘤壞死因子-受體1規(guī)格:48T *cAMPHuman人環(huán)磷酸腺苷規(guī)格:48T *sCD40LHuman人可溶性細(xì)胞表面分化抗原40配體規(guī)格:48T *cGMPHuman人環(huán)磷酸鳥苷規(guī)格:48T *6Ckine/CCL21/SLCHuman人淋巴組織趨化性細(xì)胞因子規(guī)格:48T *ENAhuman人上皮細(xì)胞誘導(dǎo)中型粘細(xì)胞活化因子規(guī)格:48T *ENA-78human人趨化因子ENA-78規(guī)格:48T *eNOShuman人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶規(guī)格:48T 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞系;TPA 2-14培養(yǎng)貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。點(diǎn)擊進(jìn)入了解更多小鼠源細(xì)胞。 |