小鼠表皮角質形成細胞提取物說明書

小鼠表皮角質形成細胞提取物【Mouse Skin: Normal Epidermal Keratinocytes Derivatives】

小鼠表皮角質形成細胞提取物是從小鼠原代表皮角質形成細胞提取的，小鼠原代表皮角質形成細胞從正常小鼠皮膚組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

口蹄疫3ABC病毒抗體ELISA檢測試劑盒96T*2Ethyl glucoside31989乙基葡萄糖苷

豬乙腦病毒抗體ELISA檢測試劑盒96T*2Ethyl chlorogenate42582綠原酸乙酯

豬弓形蟲病毒抗體ELISA檢測試劑盒96T*2Ethyl 5-amino-cyano-(2-ethoxy-oxoethyl)thiophene-carboxylate5816

豬細小病毒抗體ELISA檢測試劑盒96T*2Ethyl 3-cyclopropyl-oxopropanoate249222

豬圓環病毒Ⅱ型抗體檢測試紙條卡/包，包/盒Ethyl 3,5-di-O-caffeoylquinate145143,5-二咖啡酰奎寧酸乙酯
Hydroxyprogesterone acetate  中文名：醋酸羥孕酮  分子式：C23H32O4  度：98.0%  小鼠氧化低密度脂蛋白(mouse OxLDL)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

Methylprednisolone hemisuccinate  中文名：  分子式：C26H34O8  度：98.0%  小鼠抑瘤素mouse  M(mouse OSM)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  

Methylprednisolone acetate  中文名：甲基潑尼松龍醋酸酯  分子式：C24H32O6  度：98.0%  小鼠6--前列腺素F1a(mouse 6-k-PGF1a)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

11β,17α-Dihydroxy-6α-methylpregna-1,4-diene-3,20-dione  中文名：  分子式：C22H30O4  度：98.0%  小鼠前列腺素E2(mouse PGE2)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

Methylprednisolone  中文名：甲基潑尼松龍  分子式：C22H30O5  度：98.0%  小鼠0脂酶A2(mouse sPLA2)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝
腺苷激酶抑制劑  Adenosine Kinase Inhibitor  質量規格：美國進口 英文名稱HumanFibronectinELISAKit人纖維連接蛋白(FN)規格：96T/48T

2-氨基腺苷  2-Amino Adenosine  質量規格：美國進口 英文名稱HumanFIIELISAKit人凝血因子II(FII)ELISAKit規格：96T/48T

5'-乙基酰胺基-2',3'-亞異丙基腺苷  5'-Ethylcarboxamido-2',3'-isopropylidene Adenosine  質量規格：美國進口 英文名稱HumanFIXELISAKit人凝血因子IX(FIX)規格：96T/48T

別嘌醇核苷  Allopurinol riboside  質量規格：美國進口 英文名稱HumanFIXELISAKit人凝血因子IX規格：96T/48T

N-乙酰兩性霉素B  N-Acetyl Amphotericin B  質量規格：美國進口 英文名稱HumanFlt-3ELISAKit人Flt-3規格：96T/48T

血管緊張素 片段1-7醋酸鹽水合物  Angiotensin Fragment 1-7 acetate salt hydrate  質量規格：美國進口 英文名稱HumanFLT3ELISAKIT人FMS樣酪氨酸激酶3(FLT3)規格：96T/48T

[Val5]-血管緊張素 II 醋酸鹽水合物  [Val5]-Angiotensin II acetate salt hydrate   質量規格：美國進口 英文名稱HumanFlt-3ligandELISAKit人Flt-3配體(Flt-3ligand)規格：96T/48T

阿替洛爾酸  Metoprolol Acid  質量規格：美國進口 英文名稱HumanFollistatinELISAKit人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒規格：96T/48T

(R)-(+)-阿替洛爾  (R)-(+)-Atenolol  質量規格：美國進口 英文名稱HumanFractalkineELISAKit人Fractalkine規格：96T/48T

S-(-)-阿替洛爾  S-(-)-Atenolol  質量規格：美國進口 英文名稱HumanFree-T3ELISAKit游離*狀腺原氨酸(Free-T3)規格：96T/48T
小鼠表皮角質形成細胞提取物說明書綿羊球蛋白A   英文名稱：   Immunoglobulin A   規格：   48T/96T   英文縮寫：   IgA  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol  中文名：3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇  分子式：C21H32O2  度：93.0%

綿羊促卵泡生成激素   英文名稱：   Follicle Stimulating Hormone   規格：   48T/96T   英文縮寫：   FSH  3-Ethyl-4-methyl-3-pyrrolin-2-one  766-36-9  中文名：  分子式：C7H11NO 

綿羊白介素2(IL-2)ELISAKit                 Allyl phenoxyacetate  中文名：苯氧乙酸烯丙酯  分子式：C11H12O3 

綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa試劑盒   綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒   規格型號：96T/48T   綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒、綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one  972-46-3  中文名：3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮  分子式：C21H30O2 

綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISAKit     Allyl phenoxyacetate  中文名：苯氧乙酸烯丙酯  分子式：C11H12O3  度：98.0%

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。