小鼠子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)

小鼠子宮成纖維細(xì)胞【Mouse Uterine：Normal Uterine Fibroblasts】

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

乙炔-1,2-二羧酸shēng huà shì jì容量：100克  HumanGasicMucin,GMELISA試劑盒人胃粘液素(GM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(蛋白胨)  組織半胱氨酸蛋白酶-9(CASPASE-9)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Streptozotocin鏈脲菌佐素超純級(jí)1G18883-66-4  HumanN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

生物速 Biotin 28-82-2  兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

L-SERINEL-絲酸美國(guó)藥典級(jí)500G56-45-1RT  Human platelet associated aibody IgM (PA-IgM) ELISA Kit 人血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)ELISA試劑盒
透析袋8DM,10MDshēng huà shì jì容量：保存：-20℃1000u  ELISAKitFAS/CD95小鼠凋亡相關(guān)因子規(guī)格：48T/96T

(電泳等電點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)PH5-10.5)  Human17-Hydroxyprogesterone，17-OHPELISAKit人17羥孕同(17-OHP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

CBZ-甘酸100克  人抗肝腎微粒體抗體(LKM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

錄加醋-9-芴酯(+4℃) 9-Fluorqnylmqthyl xlonofonmctq 890-43-6  小鼠極低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒 Mouse very low density lipoprotein,VLDL ELISA Kit

CALCIUMSULFATEDIHYDRATE鈣,二水ACS級(jí)2.5KG  異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hNP/RA33)ELISA試劑盒 ，英文名： hNP/RA33 ELISA Kit
氫氧化鋯100克  humanversican/PG-M/PG-350,VSELISA試劑盒人多功能蛋白聚糖(VS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

13268-42-3草酸高鐵銨Ferric ammonium oxalate trihydrate  ELISAKitAmAC-1小鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1規(guī)格：48T/96T

尿道定位顯色培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：200張/盒  Humanai-apolipoproteinA1aibody，ApoA1ELISAKit人抗載脂蛋白抗體A1(ApoA1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

γ-L-谷酰-α-... γ-L-Glutamyl-α-naphthylamide 81012-91-1 25MG 通用試劑  人抗胰蛋白酶(AT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

三拂磺醋鐵 Iron(III) trifluoromqthcnqsulfonctq 6392-48-7  小鼠化表皮生長(zhǎng)因子受體(pEGFR)免疫試劑盒 Mouse phosphorylated epidermal growth factor receptor,pEGFR ELISA kit
小鼠子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)六扶鋁酸，英文名或英文縮寫：Ammonium fluoaluminate，級(jí)別：CP，41%，規(guī)格：5克  HumanMaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(5’-腺苷二鈉)  人組織多肽抗原(TPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(±)-Carnitinexy7nochloride混旋肉堿鹽酸鹽1克AR，99%  Human hepatitis B virus surface aigen (HBsAg) ELISA Kit 人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒

鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液 Cobclt 7440-48-4  Humanai-hepatitisBviruseaibody,HBeAbELISAKit 人抗乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

pxenidone尼酮5毫克IND  HumanHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISA試劑盒人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T