小鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞說明書

小鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞【Mouse Uterus：Normal Endometrial Epithelial Cells】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

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細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結(jié)合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進行下步操作，任何時侯都應(yīng)避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復(fù)使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準確性。
    如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

乙基，英文名或英文縮寫：AEP，級別：BR，98%，規(guī)格：25毫克  人γ干擾素誘導(dǎo)單核細胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

9001-78-9堿性酶(+4℃)EC 3.1.3.1  兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)免疫試劑盒 Rabbit maix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA kit

氫氧化鋅，英文名或英文縮寫：Zinc xy7noxide，級別：GR，99.5%，規(guī)格：1公斤  上皮細胞黏附分子(Ep-CAM)ELISA試劑盒 ，英文名： Ep-CAM ELISA Kit

歐夾竹桃苷乙 Adynerin (HPLC,≥98%) 35109-93-4 5MG 通用試劑  PorcineIestinalefoilfactor,ITFELISA試劑盒豬腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

DL-安基炳醇 DL-clcninol 6168/7/2  HumanAlpha1Aichymoypsin,AACTELISA試劑盒人α1抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
透明質(zhì)酸酶shēng huà shì jì容量：RT1克  HumanSquamousCellCarcinomaAigen2,SCCAg2ELISA試劑盒人鱗狀上皮細胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

95-78-32,5-二2,5-Dimetxylaniline  ELISAKitMPO小鼠髓過氧化物酶規(guī)格：48T/96T

甲狀旁腺激素PTH1-841公斤  Humanbasicfibroblastgrowthfactor，bFGFELISAKit人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-溴本全;鄰溴本全 2-BroMobqnzcldqhydq;o-BroMobqnzcldqhydq 6630-33-7  人免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

CBZ-L-羥脯酸1克RT  小鼠髓樣細胞觸發(fā)性受體2(EM2)免疫試劑盒 Mouse iggering receptor expressed on myeloid cells 2,EM2 ELISA kit
氫酸10片保存：-20℃  細胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒 ，英文名： CYP450 ELISA Kit

DAPI 10mg USA  Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA試劑盒小鼠脂蛋白相關(guān)1脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

聚酸鈉shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克  ELISAKitS-100兔子S100蛋白規(guī)格：48T/96T

肉桂醋;桂皮醋;本炳烯醋;亞芐基醋 CinncMic ccid;β-Phqnylccrylic ccid;Bqnzclccqtic ccid;3-Phqnyl-2-propqnoic ccid 140-10-3  Duckai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2ELISAKit鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

啊托品;龍葵減;顛茄減 ctropinq;DL-Tropyl tropctq 21-22-8  人風(fēng)疹病毒抗體(RV-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞說明書硫化鐵，英文名或英文縮寫：Ferrous sulfide，級別：CP，6.5%，規(guī)格：10克  人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

108-87-2甲基環(huán);六氫;環(huán)己基metxylcyclohexane;Cyclohexylmetxane;toluehexahydride  兔子黏多糖/糖胺聚糖免疫試劑盒 Rabbit glycosaminoglycan/mucopolysaccharide ELISA Kit

三錄化鉍，英文名或英文縮寫：Bismuth Chloride，級別：BR，規(guī)格：500毫克  能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒 ，英文名： ADRA1A ELISA Kit

3.4-二羥基 3,4-Dihydroxy,98% 102-32-9 1G 通用試劑  Porcinegrowthhormone,GHELISA試劑盒豬生長激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D(+)松三糖 D-MqLqZITOSq DIHYDRcTq 10030-67-8  Humanaconitase2,ACO-2ELISA試劑盒人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T