小鼠胎兒表皮角質形成層細胞提取物【Mouse Embryo: Normal Fetal Epidermal Keratinocytes Derivatives】 小鼠胎兒表皮角質形成層細胞提取物是從小鼠原代胎兒表皮角質形成層細胞提取的,小鼠原代胎兒表皮角質形成層細胞從正常小鼠胚胎組織制備。所有的產品在發(fā)貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產品名稱 | 小鼠胎兒表皮角質形成層細胞提取物價格 | 英文名稱 | Mouse Embryo: Normal Fetal Epidermal Keratinocytes Derivatives | 貨號 | EYX99176 |
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作要點: 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。 枯草芽孢桿菌DL1mlAcetyl meldrum's acid8593 糞球菌GIRF1mlAcetophenone tosylhydrazone45451苯乙酮對甲苯磺酰基腙 糞球菌OGIRF1mlAcetoacetanilide21乙酰 pP1C.3 with DNA Recombinase(單子葉植物敲除Abscisic acid143755脫落酸 pP1C.34μgAbiraterone acetate1542298乙酸阿比特龍酯 Ilaprazole 172152-36-2 中文名:艾普拉唑 分子式:C19H18N4O2S 度:98.0% 小鼠松弛素 英文名稱: Mouse Relaxin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: RLN Ikshusterol 3-O-glucoside 112137-81-2 中文名: 分子式:C35H60O7 度:% 關鍵詞: 異株蕁麻; 豆甾烷; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫 小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISAKit Hypocrellin A 77029-83-5 中文名:竹紅菌甲素 分子式:C30H26O10 度:95.0% 關鍵詞: 抗艾滋病毒; 對照品; 標準品; 微生物代謝產物; 天然產物; 天然產物庫 小鼠轉化生長因子α(TGF-α)ELISAKit Hydroxyprogesterone acetate 302-23-8 中文名:醋酸羥孕酮 分子式:C23H32O4 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISAKit Hydroxyprogesterone 68-96-2 中文名:羥孕酮 分子式:C21H30O3 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISAKit 香草酸 Vanillic acid 質量規(guī)格:>98% 小鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒 ,英文名: PTH ELISA Kit 香蒲新苷(標準品) Typhaneoside 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 香葉木素-7-O-葡萄糖苷(標準品) Diosmetin-7-O-β-D-glucopyranoside 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)ELISA檢測試劑盒MouseParathyroidHormone-LikeRelatedProtein,PTHrPELISAKit 96T/48T 香紫蘇醇(標準品) Sclareol 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒 ,英文名: PTHrP ELISA Kit 小檗堿(標準品) Berberine 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠甲狀旁腺素受體2(PTHR2)ELISA試劑盒 ,英文名: PTHR2 ELISA Kit 新補骨脂異黃酮(標準品) Neobavaisoflavone 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 新橙皮苷(標準品) Neohesperidin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒 ,英文名: TPO ELISA Kit 新穿心蓮內酯(標準品) Neoandrographolide 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠甲狀腺激素受體交互子6(IP6)ELISA試劑盒 ,英文名: IP6 ELISA Kit 新芒果苷(標準品) Neomangiferin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒 ,英文名: TBG ELISA Kit 熊果苷(標準品) Arbutin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 小鼠胎兒表皮角質形成層細胞提取物價格酶(CAT)檢測 Catalase (CAT) detection Rasagiline mesylate 161735-79-1 中文名:甲磺酸雷沙吉蘭 分子式:3S 酶(CAT)測定試劑盒(可見光法) Ribavirin 中文名:利巴韋林 分子式:C8H12N4O5 馬流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Stigmast-4-ene-3β,6β-diol 中文名:豆甾-4-烯-3β,6β-二醇 分子式:C29H50O2 度:93.0% 馬流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸檢測試劑盒(-PCR法) 48T Stigmast-4-ene-3β,6β-diol 中文名:豆甾-4-烯-3β,6β-二醇 分子式:C29H50O2 麻風桿菌(ML)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T 3-Amino-4-hydroxybenzoic acid 1571-72-8 中文名:3-氨基-4-羥基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 |