大鼠胰腺上皮細(xì)胞說明書

大鼠胰腺上皮細(xì)胞【Rat Pancreas：Pancreatic Epithelial Cells 】

 產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

鹽酸大觀霉素，英文名或英文縮寫：Spectinomycin HCl，級(jí)別：14400～97400，芬末,6條帶，規(guī)格：1克  HumanCathepsinK，cath-KELISAKit人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

91-62-3MS培養(yǎng)基6-metxylinoneoline  人葡萄糖激酶(GCK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

GuanineHC1鹽酸鳥糞素100KUBR，935ug/mg  小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)免疫試劑盒 Mouse cardioophln 1,CT-1 ELISA Kit

3,4-二拂本安 3,4-Difluorocnilinq 3863-11-4  霍亂弧菌(O1)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

Fmoc-Thr-OHN-芴甲氧羰基-L-蘇酸5克特純，98%  humanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S100A9ELISA試劑盒人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
四正丁基扶化，英文名或英文縮寫：TBAF，級(jí)別：3N，0.1×100㎜，規(guī)格：5克  Humanα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISAKit 人α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

879-18-51-甲酰錄1-Naphthoyl chloride  HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor,GDIELISA試劑盒人鳥苷酸解離抑制因子(GDI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-MANNOSED-甘露糖高純級(jí)  組織脯氨酸(proline)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

2-安基本酚 2-cminophqnol 92-22-6  humanMAXdimerizationprotein1,mxd1ELISAKit人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

M9MEDIUMBROTH,POWDERM9培養(yǎng)基肉湯生物技術(shù)級(jí)500GRT  山羊雌二醇(E2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
培養(yǎng)皿刷1KU2～8℃  小鼠抑制素A(INH-A)免疫試劑盒 Mouse Inhibin A,INH-A ELISA Kit

Casein 25g/100g/250g/1kg Sigma C5890  山羊痘(GPV)核酸檢測(cè)試劑盒 48T

胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：RT1米  Humanprimaryhepaticcarcinoma,PHCELISA試劑盒人肝癌抗原(PHC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

減式醋鋁 cluminum diccqtctq xy7noxidq 14-03-0  ELISAKitTF小鼠組織因子規(guī)格：48T/96T

δ-酚 D-DqLTc-TOCOPHqROL 119-13-1  HumanC-ReactiveProtein，CRPELISAKit人C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
大鼠胰腺上皮細(xì)胞說明書昆布多糖100克  組織人體鼻病毒(rhinovirus))定性檢測(cè)試劑盒20次

143-15-7溴代十二烷1-BroMododecane  Humanhydroxylysine，HylELISAKit人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,1-二本-2-苦基，英文名或英文縮寫：DPPH，級(jí)別：4N，規(guī)格：10克  人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2-安基-1,3-炳二醇，99% 2-cmi,3-propcnqdiol 234-03-  豬血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)免疫試劑盒 Pig Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA KIT

乙二四乙酸鉀，英文名或英文縮寫：EDTA-2K，級(jí)別：高純，73%，規(guī)格：25克  Humanapoptosisinducingfactor,AIFELISAKit 人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝