小鼠腎足突細胞提取物

小鼠腎足突細胞提取物【Mouse Kidney: Normal Kidney Derivatives】

小鼠腎足突細胞提取物是從小鼠原代腎足突細胞提取的，小鼠原代腎足突細胞從正常小鼠腎組織制備。所有的產品在發(fā)貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產品現貨，超低比價，產品名稱貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。

細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數。

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

快速蛋白銀染試劑盒   25次 5-Amino-methylindole7595-氨基-甲基吲哚

麗春紅染色液  0ml 5-Amino-mercaptobenzimidazole281865-氨基-并咪唑

糖蛋白染色試劑盒   次5-Amino-naphthol8355-氨基-萘酚

BCA蛋白濃度測定試劑盒次/0次5-Amino,3-dihydroH-benzimidazol-one9535-并咪唑酮

Bradford蛋白濃度測定試劑盒次/00次 5-Amino-(2-hydroxyethyl)pyrazole736167
Iloperidone  中文名：伊潘立酮  分子式：C24H27FN2O4    豬肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒            

Ilaprazole  中文名：艾普拉唑  分子式：C19H18N4O2S    豬紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒  

Ikshusterol 3-O-glucoside  中文名：  分子式：C35H60O7    豬黑色素瘤轉移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒  

Hypocrellin A  中文名：竹紅菌甲素  分子式：C30H26O10    豬核轉錄因子kb-p65(NF-kBp65)ELISA試劑盒  

Hydroxyprogesterone acetate  中文名：醋酸羥孕酮  分子式：C23H32O4    豬核因子κB抑制蛋白α（IKB-α）ELISA試劑盒
香草酸 HPLC≥97% 100mg HumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKit 人NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香草乙酮 HPLC≥98% 20mg HumanNon-PhosphorylatedIGFBP-1ELISAKit 人未0酸化類胰島素生長因子結合蛋白-1ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香豆素 HPLC≥98% 20mg humanNoradrenaline,NAELISAKit 人去甲(NA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香蜂草苷 HPLC≥98% 20mg HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKIT 人N端前腦素(-proBNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香荊芥酚 HPLC≥98% 50mg Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISAKit 人八聚體轉錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香蘭素 HPLC≥98% 20mg Humanoctameranscriptionfactor2B,OTF2BELISAKit 人八聚體轉錄因子(OTF2B)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香蒲新苷 HPLC≥98% 20mg humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香葉醇 HPLC≥98% 20mg Humanparaoxonase,PONELISAKit 人酶(PON)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香葉木素 HPLC≥98% 20mg Humanpeptidoglycan,PGELISAKit 人肽聚糖(PG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香葉木素O葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit 人肽基脯氨酰順反異構酶(PPI)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
小鼠腎足突細胞提取物綠膿桿菌(PA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  3-Quinuclidinone  3731-38-2  中文名：3-奎寧環(huán)酮  分子式：C7H11NO 

綠膿桿菌(PA)核酸檢測試劑盒   48T  3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid  中文名：  分子式：C19H29NO3  度：98.0%

鹿胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)ELISAKit     3-Benzalphthalide  575-61-1  中文名：3-亞芐基苯酞  分子式：C15H10O2 

鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISAKit                 3-Aminopiperidine dihydrochloride  中文名：  分子式：C5H14Cl2N2 

鹿內皮型合成酶(eNOS)ELISAKit     3-Aminopiperidine dihydrochloride  中文名：  分子式：C5H14Cl2N2  度：98.0%