冷凍保存細胞之方法: 小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 產品描述: 細胞名稱 小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)說明書 形態特性成纖維細胞樣 生長特性貼壁生長 特征特性L-M(TK-)細胞是L-M(ATCCCCL-1.2)細胞系的衍生株,具有抗5-溴脫氧尿核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BUdR)、缺乏胸腺嘧啶核苷激酶(thymidinekinasemutant)的特性,廣泛用于遺傳學、生物化學基礎研究。也可用在體細胞雜交、基因轉移等實驗研究中。 培養條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS 傳代方法1:3傳代,2-3天傳一代 傳代情況C36 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測陰性 STR 同工酶同工酶鑒定 染色體
細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)說明書準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 注意事項: ?1.一般客戶拿到小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)說明書后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 小鼠星形膠質細胞(MA)(5×105) 人牙齦成纖維細胞總RNAHGF NA 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21 小鼠肺腺癌低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);LA1-GFP 小鼠視網膜muller細胞*培養基 100mL hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細胞 Human CPA1 Others Human 人 Carboxypeptidase-A1 / CPA1 人細胞裂解液 (陽性對照) 小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)說明書*AM(Adrenomedullin;ADM)腎上腺髓質素(多肽抗原)規格:0.1mg *5-HTR1A(5-HT1A(5-hydroxytryptamine/serotoninreceptor1A;5HT1a;ADRBRL1;ADRB2RL1;HTR1A)5-羥色胺受體1A(多肽)規格:0.5mg *TIMP-2(TissueInhibitorofMetalloproteinase-2)金屬蛋白酶組織抑制因子-2(抗原)規格:0.5mg *TIMP-3(TissueInhibitorofMetalloproteinase-3)金屬蛋白酶組織抑制因子(抗原)規格:0.5mg *ADMR,Adrenomedullinreceptor腎上腺髓質素受體(抗原)規格:0.5mg *VTG(vitellogenin)青鳉魚卵黃蛋白規格:0.1mg *Apaf-1(Apoptosisproteaseactivatingfactor-1)(CT)凋亡蛋白活性因子-1(抗原)規格:0.5mg *Apaf-1(Apoptosisproteaseactivatingfactor-1)(NT)凋亡蛋白活性因子-1(抗原)規格:0.5mg *AR(AndrogenReceptor)peptide雄激素受體(多肽抗原)規格:0.5mg *5-HTR2A5-羥色胺受體2A抗原規格:0.5mg 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)說明書貨期短,價格優,售后齊全。點擊進入了解更多小鼠源細胞。 |