小鼠尿道上皮細胞提取物培養

小鼠尿道上皮細胞提取物【Mouse Urethral: Normal Urethral Derivatives】

小鼠尿道上皮細胞提取物是從小鼠原代尿道上皮細胞提取的，小鼠原代尿道上皮細胞從正常小鼠尿道組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

喹諾酮類藥物殘留酶聯免疫檢測試劑盒Cefozopran hydrochloride1139814鹽酸頭孢唑蘭

萊克多巴胺殘留酶聯免疫檢測試劑盒Cefotaxime 644853頭孢噻肟鈉

氯霉素殘留酶聯免疫檢測試劑盒Cefixime7937頭孢克肟

克侖特羅殘留酶聯免疫檢測試劑盒Cefcapene pivoxil hydrochloride1478164鹽酸頭孢卡品酯

呋喃妥因代謝物殘留酶聯免疫檢測試劑盒Caudatin383952告達庭
Imatinib  152459-95-5  中文名：伊馬替尼  分子式：C29H31N7O    人內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISAKit              

Mitiglinide calcium  145525-41-3  中文名：米格列奈鈣  分子式：C19H25NO3    豚鼠白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

9-Aminominocycline hydrochloride  149934-21-4  中文名：  分子式：C23H29ClN4O7    Human cytochrome P450c21A/21- hydroxylase (CYP21A) ELISA Kit 人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒

Minocycline hydrochloride  13614-98-7  中文名：  分子式：C23H28ClN3O7    HumanMousemyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Benzyl 2-aminoacetate p-sulfonate  1738-76-7  中文名：  分子式：C16H19NO5S    HumancyclophilinB,CyPBELISA試劑盒人嗜環蛋白/親環素B(CyPB)ELISA試劑盒規格：96T/48T
香豆素120；7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)  7-Amino-4-methylcoumarin   質量規格：>97% 人動力蛋白輕鏈1,細胞質(DYNLL1/DLC1/DNCL1/DNCLC1/HDLC1)試劑盒 Human DYNLL1 ELISA kit

Duvelisib (IPI-145)  IPI-145 (INK1197)  質量規格：>98%,選擇性的PI3K δ/γ抑制劑 人毒性休克綜合征1(TSST-1)ELISA檢測試劑盒Humaoxicshocksyndrometoxin,TSST-1ELISAKit 96T/48T

5--4-氯-3吲哚神經氨酸鈉鹽  X-NeuNAc   質量規格：>98%,美國進口 人毒蕈堿型乙酰膽堿受體M2(mAChRM2)自身抗體試劑盒 Human muscarinic acetylcholine receptor M2(mAChRM2)aoaibody ELISA kit

ABEI；N-（4-氨丁基）-N-乙基異魯米諾  N-(4-Aminobutyl)-N-ethylisoluminol  質量規格：>97%,進分 人端粒保護蛋白1(POT1)試劑盒 Human POT1 ELISA kit

TTAC；十四烷基*基氯化銨  Tetradecyltrimethylammonium chloride  質量規格：>99%,AR 人端粒酶(TE)試劑盒 Human telomerase,TE ELISA Kit

DTAC；十二烷基*基氯化銨  Dodecyltrimethylammonium chloride(DTAC)  質量規格：>99%,BR 人端粒酶逆轉錄酶(TE)試劑盒 Human TE ELISA Kit

CTAC;十六烷基*基氯化銨  CTAC  質量規格：>99% 人端粒重復序列結合因子1(TERF1)試劑盒 Human TERF1 ELISA kit

十八烷基*基氯化銨  Stearyl Trimethyl Ammoium Chloride(STAC)  質量規格：>99%,BR 人端粒重復序列結合因子2(TERF2)試劑盒 Human TERF2 ELISA kit

十烷基*基氯化銨  Decyltrimethylammonium chloride  質量規格：>99% 人對(PABA)ELISA檢測試劑盒Humanpara-aminobenzoicacid,PABAELISAKit 96T/48T

辛基*基氯化銨;八烷基*基氯化銨  Trimethyloctylammonium chloride   質量規格：>99%,BR 人對(PABA)試劑盒 Human para-aminobenzoic acid,PABA ELISA Kit
小鼠尿道上皮細胞提取物培養流行性腮腺炎病毒(MV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Norfloxacin lactate  中文名：乳酸諾氟沙星  分子式：C19H24FN3O6 

痢疾桿菌(SH)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Trazodone hydrochloride  中文名：鹽酸曲唑酮  分子式：C19H23Cl2N5O 

類風濕因子（RF）測定試劑盒（膠乳增強比濁法）  Rifampicin  13292-46-1  中文名：利福平  分子式：C43H58N4O12  度：96.5%   

萊克多巴胺檢測試紙條(組織)   Ractopamine test sip (Organization)  Pidotimod  121808-62-6  中文名：匹多莫德  分子式：C9H12N2O4S  度：98.0%  關鍵詞： 

萊克多巴胺檢測試紙條（尿樣）   Ractopamine test sip (urine)  Pidotimod  中文名：匹多莫德  分子式：C9H12N2O4S

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。