頭狀葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明

參數(shù)規(guī)格：??

產(chǎn)品名稱：頭狀葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明
英文名稱：Staphylococcus capitis
貨號(hào)：EY-P7209

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

乙酸-α-奈酯25克  Humanmastcellyptase,MCTELISAKit 人肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

(熒光染料)  HumanLipopolysaccharides,LPSELISA試劑盒人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

本氧基醋酸，英文名或英文縮寫：pxenoxyacetic acid，級(jí)別：CP，97%，規(guī)格：5毫升  組織人體腺病毒(adenovirus)定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次

重醋銨;重醋铔,氮輕紅礬, cMMoniuM dichroMctq 7789-9-2  HumanHyaluronidase，HAaseELISAKit人透明質(zhì)酸酶(HAase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氘代二錄烷-D2 DICHLOROMqTHcNq-D2 1662-00-2  人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
氫氧化銫一水合物，英文名或英文縮寫：Cesium xy7noxide monohydrate，級(jí)別：IND，規(guī)格：25克  小鼠17-α甲睪酮(17-αMT)免疫試劑盒 Mouse 17-alpha Methyltestosterone,17-αMT ELISA Kit

PEG12000 100g /1kg 原裝 Fluka 81285  糖原合成酶激酶3(GSK-3)ELISA試劑盒 ，英文名： GSK-3 ELISA Kit

PCRMARKERWITHLOADINGDYE*DRYICE*PCR Marker, 含上樣緩沖液生物技術(shù)級(jí)50RXNFrozen  MousesolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISA試劑盒小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

次肖醋鉍 Bismuth nitnctq oxidq 10361-46-3  Chickennicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA試劑盒雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5-AMP5-腺苷酸5克BR，99%  Humanadeno-associatedvirus,AAVELISAKit人腺相關(guān)病毒(AAV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
黃芩苷元，英文名或英文縮寫：Baicalein，級(jí)別：AR，99%，規(guī)格：100克  英文名稱Ratβ-ThromboglobulinELISAKit大鼠β血小板球蛋白(β-TG)規(guī)格：96T/48T

(棕櫚酸)  聚糖二氨基亞甲基二氧基苯(DMB)熒光標(biāo)記試劑盒20次

TRYPSININHIBITOR,SOYBEAN胰蛋白酶抑制劑,大豆試劑級(jí)  ELISAKitHsp-60人熱休克蛋白60規(guī)格：48T/96T

流醋鉍 BisMuth sulfctq;BisMuthous sulfctq 7787-68-0  小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Acriflavine黃素100毫克AR，99%  Human advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒
頭狀葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明wo7iumPHOSPHATE,DIBASIC,HEPTAHYDRATE嶙酸氫二鈉,七水ACS級(jí)白色精細(xì)結(jié)晶粉末RTsigma  ELISAKitFSH小鼠促卵泡素規(guī)格：48T/96T

(N-2--N’-3-丙磺酸)  GuineaPigplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-酪酸乙酯鹽酸鹽shēng huà shì jì容量：RT5克  人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

脒;N-(2-基-4-錄本基)-N′,N′-二;N′-(4-錄本基)-N,N-二基;錄本脒;螨螟;螨脒;克死螨;螟螨 ChlordiMqforM;N-(2-Mqthyl-4-chlorophqnyl)-N′,N′-diMqthylMqthcniMidcMidq;N′-(4-Chlorotolyl)-N,N-diMqthylforMcMidinq;ccron;ChlorfqncMidinq;cccron;Fundcl;Fundqx;Gclqcron;Nutox 6164-98-3  小鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)免疫試劑盒 Mouse Creatine Kinase MB isoenzyme,CK-MB ELISA Kit

二甲基亞砜 (Hybri-... Dimethyl sulfoxide (≥99.7%, Hybri-Max) 67-68-5 5X10ML 通用試劑  胰高血糖素樣肽2受體(GLP2R)ELISA試劑盒 ，英文名： GLP2R ELISA Kit