大鼠胎兒真皮成纖維細胞培養

大鼠胎兒真皮成纖維細胞【Rat Embryo: Normal Fetal Dermal Fibroblasts】

 產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩定。在公司部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產品現貨，超低比價，產品名稱貨期短，價格優，售后齊全。

細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數。

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

亞利桑那菌瓊脂shēng huà shì jì容量：RT1米  MousePlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISA試劑盒小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒規格：96T/48T

(環已胺)-1-丙磺酸)  ChickenC-ReactiveProtein,CRPELISA試劑盒雞C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

IPTG(NAO)IPTG, 非動物源高純級1 g367-93-1Frozen  Human17-ketosteroids，17-KSELISAKit人17-同類固醇(17-KS)ELISA試劑盒規格：96T/48T

流醋鋁 cluMinuM Sulfctq (cS) 7784-31-8  人蛋白S(Protein S)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

D-葡萄糖-6-鱗醋二內鹽(-20℃) D-Glucosq-6-phosphctq diwo7ium sclt 3671-99-6  小鼠B細胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)免疫試劑盒 Mouse B-cell lymphoma-exa large,Bcl-xl ELISA kit
司班85，英文名或英文縮寫：Span 85，級別：AR，87%，規格：100克  小鼠E1A激活基因阻遏子1(CREG1)ELISA試劑盒 ，英文名： CREG1 ELISA Kit

MaltExtract 100g/500g BD/Sigma分裝  人烯醇式酸羧激酶(PCK)ELISA檢測試劑盒Humanphosphoenolpyruvatecarboxykinase,PCKELISAKit 96T/48T

B9N-二甲基琥珀酰胺酸100克USP級，98.5%  大鼠谷氨酸免疫試劑盒 Rat Glamate ELISA Kit

錄化芐;芐基錄;錄本 Bqnzyl chloridq;ω-Chlorotoluqnq;1-ChloroMqthylbqnzqnq  CLIAKitforVEGFR-2/Flk-1ELISAKit大鼠血管內皮細胞生長因子受體2規格：48T/96T

葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-25 Coarse 9041-35-4 100G 分離試劑  免疫細胞化學AP酶聯NBT/BCIP基礎檢測試劑盒(無一抗和二抗)50次
檸檬酸鐵shēng huà shì jì容量：5克  人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA檢測試劑盒humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKIT 96T/48T

ProtaminSulfate 1g/5g/25g/100g 原裝 Sigma P4380  大鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 3α,MIP-3α ELISA Kit

甲基-α-D-半乳糖苷100克  英文名稱RatIerleukin23ELISAKit大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規格：96T/48T

流吩嗪(-20℃) 5-Mqthylphqnczinium mqthosulfctq 1999/11/6  酒類總乳酸比色法定量檢測試劑盒20次

IMIDAZOLECHROMA.BUFFER,5X,PH7.0咪唑層析緩沖液蛋白組學級100MLCOLD  ELISAKitHG人皰疹抗體規格：48T/96T
大鼠胎兒真皮成纖維細胞培養卡氏試液，英文名或英文縮寫：Karl Flscher reagent，級別：CP，99%，規格：25克  ELISAKitgp130小鼠糖蛋白130規格：48T/96T

102白色硅烷化擔體NA  Humanbetacellulin,BTCELISAKit人β細胞素(BTC)ELISA試劑盒規格：96T/48T

100XDENHARDT'SSOLUTION*DRYICE*DENHARDT'S溶液,100X生物技術級10MLFrozen  人膜輔蛋白(MCP/CD46)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2-羌基-5-氧基本全 2-xy7noxy-5-mqthoxybqnzcldqhydq 67-13-9  小鼠酶1(CA-1)免疫試劑盒 Mouse carbonic anhydrase 1,CA-1 ELISA Kit

SUCROSE20%STERILE蔗糖溶液生物技術級100ML57-50-1RT  牛特定基因序列(Bovine)核酸檢測試劑盒 48T