人心肌組織提取物【Cardiac: Normal Human Cardiac Derivatives】 心主要由心肌構成,是連接動、靜脈的樞紐和心血管系統的“動力泵”。公司科技提供來自新鮮或冷凍人心肌組織中高質量的總RNA,PCR準備的第一條cDNA鏈,蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫院,采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產品名稱 | 人心肌組織提取物 | 英文名稱 | Cardiac: Normal Human Cardiac Derivatives | 貨號 | EYX99299 |
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作要點: 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 鼻疽伯克霍爾德菌核酸檢測試劑盒盒Solanesol1317茄尼醇 馬丘波病毒核酸檢測試劑盒盒 prasterone sulfate997去氫表雄酮硫酸鈉鹽 創傷孤菌核酸檢測試劑盒盒 cholate3619膽酸鈉 蠟樣芽孢核酸檢測試劑盒盒Sitosteryl palmitate285β-谷甾醇棕櫚酸酯 貝氏柯克斯體核酸檢測試劑盒盒Sitostenone581豆甾-烯-酮 Ethyl β-D-apiofuranoside 中文名: 分子式:C7H14O5 豬流感病毒通用型(SIV-U)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Ethyl rutinoside 中文名:蕓香糖乙苷 分子式:C14H26O10 豬流感病毒通用型(SIV-U)核酸檢測試劑盒(-PCR法) 48T Ethyl glucoside 中文名:乙基葡萄糖苷 分子式:C8H16O6 馬流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Ethyl chlorogenate 中文名:綠原酸乙酯 分子式:C18H22O9 馬流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸檢測試劑盒(-PCR法) 48T Ethyl 5-amino-4-cyano-3-(2-ethoxy-2-oxoethyl)thiophene-2-carboxylate 中文名: 分子式:C12H14N2O4S 豬球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 十二烷基硫酸鋰 Lithium Dodecyl Sulfate 質量規格:>98%,分子生物學級 人補體片斷4b(C4b)ELISA檢測試劑盒HumanComplemefragme4b,C4bELISAKit 96T/48T 硫代甜菜堿 8 Sulfobetaine 8 質量規格:>98%,sigma分裝 人補體片斷4b(C4b)試劑盒 Human Compleme fragme 4b,C4b ELISA Kit 硫代甜菜堿 10 Sulfobetaine 10 質量規格:>98%,BR 人補體片斷5a(C5a)試劑盒 Human Compleme fragme 5a,C5a ELISA Kit 硫代甜菜堿 12 Sulfobetaine 12,SDDAB 質量規格:>98%,BR 人補體片斷5b(C5b)ELISA檢測試劑盒HumanComplemefragme5b,C5bELISAKit 96T/48T 恩他卡朋;COMT抑制劑 Entacapone 質量規格:>99%,BR 人補體片斷5b(C5b)試劑盒 Human Compleme fragme 5b,C5b ELISA Kit 曲拉通X-114 Triton X-114 質量規格:BC 人補體因子B前體(pre-CFB)試劑盒 Human compleme factor B precursor,pre-CFB ELISA Kit 曲拉通X-405 Triton X-405 質量規格:70% in H2O 人補體因子H(CFH)試劑盒 Human CFH ELISA Kit CHAPS;3-[3-(膽酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸 CHAPS 質量規格:>98.5% 人補體因子H相關蛋白1(CFHR1)試劑盒 Human CFHR1 ELISA Kit CHAPSO;3-[(3-膽氨丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸 CHAPSO 質量規格:>99%,分子生物學級; 人補體因子I(CFI)試劑盒 Human CFI ELISA Kit 二硫赤蘚醇(DTE);1,4-二硫代赤蘚醇 1,4-Dithioerythritol 質量規格:>99%,進分sigma 人不對稱二甲基精氨酸(ADMA)ELISA檢測試劑盒Humanasymmeicaldimethylarginine,ADMAELISAKit 96T/48T 人心肌組織提取物兔p物質(SP)ELISA試劑盒 4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide 83846-85-9 中文名:4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚 分子式:C20H16OS 度:98.0% 兔p物質(SP)ELISAKit 5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile 中文名: 分子式:C7H5ClN2O2 兔p53(p53)ELISA試劑盒 4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide 83846-85-9 中文名:4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚 分子式:C20H16OS 兔p53(p53)ELISAKit 5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde 231278-84-5 中文名: 分子式:C26H17ClFN3O3 兔I型膠原(rabbit Collagen I) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 4-Aza-5androstan-1-ene- 3-one-17carboxylic acid 140700-63-6 中文名: 分子式:C19H27NO3 度:98.0% 關鍵詞: |