小鼠視網膜組織提取物說明書

小鼠視網膜組織提取物【Eye: Normal Mouse Retinal Pigment Derivatives】

視網膜組織居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠視網膜組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

DEPC   ml/ml/0ml1-Methyl-aminoH-benzimidazole-butanoic acid ethyl ester35433

D-Fructose D-果糖   0g 1-Methyl-nitrophthalate2164

D-Glucose D-葡萄糖   0g 1-Indanone833

DIECA 茉莉酸合成途徑抑制劑   5g 1-Indanamine hydrochloride324573

Digitonin 洋地黃皂苷   0mg 1-Hydroxy-methylanthraquinone6268/9/31-羥基-甲基蒽醌
Cynanoside F  1800029-50-8  中文名：  分子式：C41H62O15    組織PHKG2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Periplocoside F  119902-17-9  中文名：  分子式：C63H104O23    HumanPeptideYYELISAKit人多肽YY(Peptide-YY)ELISA試劑盒規格：96T/48T

7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol  1207441-49-3  中文名：  分子式：C29H46O3    可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Minisecolide C  1967030-77-8  中文名：  分子式：C28H34O7    Human aial naiuretic peptide (ANP) ELISA Kit 人心肽(ANP)ELISA試劑盒

Withaphysalin A  57423-72-0  中文名：  分子式：C28H34O6    Humanai-PL12-aibody,PL12/AlaRSELISAKit 人PL12抗體/抗氨酰NA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
尿嘧啶（標準品）  Uracil   質量規格：HPLC法含量測定 小鼠尼克酰胺-N-甲基轉移酶(NNMT)ELISA試劑盒 ，英文名： NNMT ELISA Kit

尿嘧啶（標準品）  Uracil   質量規格：含量測定 小鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶1()ELISA試劑盒 ，英文名： ELISA Kit

丙胺肽林（標準品）  Propantheline bromide  質量規格：HPLC法含量測定 小鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶4(NOX4)ELISA試劑盒 ，英文名： NOX4 ELISA Kit

鹽酸妥洛特羅（標準品）  Tulobuterol hydrochloride  質量規格：HPLC法含量測定 小鼠黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM1)ELISA試劑盒 ，英文名： MAdCAM1 ELISA Kit

無水氫二鈉（標準品）  N-(Isoxazol-5-yl)sulphanilamide  質量規格：含量測定 小鼠鳥苷酸環化酶激活因子2A(GUCA2A)ELISA試劑盒 ，英文名： GUCA2A ELISA Kit

鹽酸拉貝洛爾（標準品）  Labetalol hydrochloride  質量規格：含量測定 小鼠鳥酸脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒 ，英文名： ODC ELISA Kit

水楊酰胺（標準品）  Salicylamide  質量規格：HPLC法含量測定 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

非普拉宗（標準品）  Feprazone  質量規格：UV法溶出度檢查 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA檢測試劑盒Mouseurokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 96T/48T

茴三硫;膽維他  Anethole trithione  質量規格：>99%,BR 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒 ，英文名： uPA ELISA Kit

茴三硫（標準品）  Anethole trithione  質量規格：含量測定 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA檢測試劑盒MouseUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAkit 96T/48T
小鼠視網膜組織提取物說明書血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒              Adefovir dipivoxil  中文名：阿德福韋酯  分子式：C20H32N5O8P 

血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISAKit     4-Aminosalicylic acid  65-49-6  中文名：4-氨基水楊酸  分子式：C7H7NO3 

血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-Methyl-5-amiH-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  中文名：  分子式：C14H19N3O2  度：98.0%

血小板衍生生長因子elisa試劑盒   血小板衍生生長因子試劑盒   規格型號：96T/48T   血小板衍生生長因子試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：血小板衍生生長因子試劑盒、血小板衍生生長因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Adefovir  中文名：阿德福韋  分子式：C8H12N5O4P  度：98.0%

血小板衍生生長因子(PDGF)ELISAKit     Acyclovir  中文名：阿昔洛韋  分子式：5O3  度：99.0%

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。