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上海一研生物科技有限公司
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小鼠晶狀體組織提取物

小鼠晶狀體組織提取物
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產品特點:
小鼠晶狀體組織提取物在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
  小鼠晶狀體組織提取物的詳細資料:

產品名稱

小鼠晶狀體組織提取物

英文名稱

Eye: Normal Mouse Lens Derivatives

貨號

EYX99415

小鼠晶狀體組織提取物【Eye: Normal Mouse Lens Derivatives

晶狀體組織位于玻璃體前側呈雙凸透鏡狀,晶體是眼球屈光系統的重要組成部分,也是具有調節能力的屈光間質。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠晶狀體組織中高質量的總RNAPCR準備的第一條cDNA鏈,蛋白質及其亞組分。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

 

實驗要點及說明;

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 

操作要點;

1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

DAPI   mg1-Naphthol5

D-Biotin(D-生物素)   1g1-Monopalmitin54241-棕櫚酸單甘油酯

D-Cellobiose D-纖維二糖   5g 1-Methyl-L,5-dihydroorotic acid336591-甲基-L,5-二氫乳清酸

DCPIP 2,6-二氯靛酚鈉   1g 1-Methyl-aminomethyl naphthalene144895

DEAE Sepharsoe FF   0ml 1-Methyl-nitroH-benzimidazole-butanoic acid ethyl ester35432
Cyclopropyl 2-fluorobenzyl ketone  中文名:  分子式:C11H11FO  度:98.0%  微量DNA凝膠回收試劑盒   50T

4,5,6,7-Tetrahydrothieno [3,2,c]pyridine hydrochloride  中文名:  分子式:C7H10ClNS  度:98.0%  MiniELGelExactionKit   100T

5,6,7,7a-Tetrahydrothieno[3,2-c]pyridine-2(4H)-one hydrochloride  中文名:  分子式:C7H10ClNOS  度:98.0%  微量樣品DNA提取試劑盒   50T

Pidotimod  中文名:匹多莫德  分子式:C9H12N2O4S  度:98.0%  MiniEleDNAKit   100T              

Dicyclanil  中文名:地昔尼爾  分子式:C8H10N6  度:98.0%  微晶纖維素   50g
尿苷-5'-二葡萄糖鈉鹽(UDPG)  Uridine-5-diphosphoglucose di salt   質量規格:>98%,Sigma 小鼠雌激素轉移酶(SULT1E1)ELISA試劑盒 ,英文名: SULT1E1 ELISA Kit

5-鳥苷一二鈉鹽(GMP)  GMP  質量規格:>98%,BR 小鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒 ,英文名: E3 ELISA Kit

腺苷-5(進口原裝)   AMP   質量規格:>99,ALFA原裝 小鼠0酸核糖基轉移酶1(HP1)ELISA試劑盒 ,英文名: HP1 ELISA Kit

腺苷-5(AMP)   Adenosine-5-monophosphoric acid   質量規格:>98,BR 小鼠級組織趨化因子6Ckine(CCL21)ELISA試劑盒 ,英文名: CCL21 ELISA Kit

5'-尿嘧啶   5-Bromouracil   質量規格:>98%,BR 小鼠刺猬因子相互作用蛋白(HHIP)ELISA試劑盒 ,英文名: HHIP ELISA Kit

尿嘧啶   Uracil   質量規格:>99%,可用于細胞培養 小鼠促紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒 ,英文名: EPO ELISA Kit

胞嘧啶   Cytosine   質量規格:>99%,BR 小鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 ,英文名: LH ELISA Kit

胞嘧啶(標準品)  Cytosine   質量規格:HPLC>98%,標準品 小鼠促甲狀腺激素(TSH)ELISA試劑盒 ,英文名: TSH ELISA Kit

硫酸腺嘌呤   Adenine sulfate   質量規格:>99%,BR,可用于細胞培養 小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

硫酸腺嘌呤(標準品)  Adenine sulfate   質量規格:HPLC>98%,標準品 小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒 ,英文名: TSH ELISA Kit
小鼠晶狀體組織提取物氧化低密度脂蛋白elisa試劑盒   氧化低密度脂蛋白試劑盒   規格型號:96T/48T   氧化低密度脂蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:氧化低密度脂蛋白試劑盒、氧化低密度脂蛋白eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。  Adefovir dipivoxil  142340-99-6  中文名:阿德福韋酯  分子式:C20H32N5O8P  度:98.0%  關鍵詞: 

氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒     Adefovir dipivoxil  中文名:阿德福韋酯  分子式:C20H32N5O8P  度:98.0%

氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISAKit     Adefovir  106941-25-7  中文名:阿德福韋  分子式:C8H12N5O4P  度:98.0%  關鍵詞: 

氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-Methyl-aminomethyl naphthalene  14489-75-9  中文名:  分子式:C12H13N  度:98.0%  關鍵詞: 

血小板因子4elisa試劑盒   血小板因子4試劑盒   規格型號:96T/48T   血小板因子4試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:血小板因子4試劑盒、血小板因子4eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。  Adefovir dipivoxil  142340-99-6  中文名:阿德福韋酯  分子式:C20H32N5O8P

運輸和保存;
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

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