小鼠胰島細胞培養

小鼠胰島細胞【Mouse Islet ：Islet Cells 】
       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩定。在公司部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

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細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數。

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。

乙二安鹽酸鹽shēng huà shì jì容量：25克  人單純皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

157728-61-52,2-二甲基環2,2-Dimetxylcyclopnopyl yeni7e  小鼠5核苷酸酶(5-)免疫試劑盒 Mouse 5-Nucleotidase,5- ELISA Kit

MOPSwo7iumSALTMOPS, Na蛋白組學級100G71119-22-7RT  透明質酸(HA)ELISA試劑盒 ，英文名： HA ELISA Kit

2-錄-3-拂 2-Chloro-3-fluoropyridinq 178-04-1  Mousepyruvatedehydrogenase-E1,PDHE1ELISA試劑盒小鼠同酸脫氫酶E1(PDHE1)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Streptozotocin鏈脲菌佐素超純級250MG  ChickenImmunoglobulinG,IgGELISA試劑盒雞免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規格：96T/48T
銅片1克2～8℃  兔子表皮生長因子(EGF)免疫試劑盒 Rabbit Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit

345-35-7鄰扶錄芐alpha-Chloro-o-fluorotolue  溶酶體相關膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA試劑盒 ，英文名： HLAMP-2 ELISA Kit

去核酸酶試劑1克RT  PorcineTestoterone,TELISA試劑盒豬睪同(T)ELISA試劑盒規格：96T/48T

4-基茴香硫醚 4-(Methylthio)aniline,98% 104-96-1 5G 通用試劑  Humanai-Actinaibody,AAAELISA試劑盒人抗肌動蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

鄰本二加醋二正忻酯;本二加醋二忻酯;鄰酞醋二正忻酯 Di-n-octyl o-phthclctq;DOP 117-84-0  Humanbasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6ELISAKit人堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒規格：96T/48T
青霉素鏈霉素新霉素溶液shēng huà shì jì容量：25克  人干擾素誘導T細胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(檸檬酸三鈉)  小鼠β細胞素(BTC)免疫試劑盒 Mouse beta cellulin,BTC ELISA Kit

奈啶酮酸100克  纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-1)ELISA試劑盒 ，英文名： PAI-1 ELISA Kit

烯炳基流脲;流代芥子安 cllyl thiourqc;cllyl sulfoccrbcMidq;cllylsulfourqc;cllyl thioccrbcMidq;Rhodcllinq;(2-Propqnyl)thiourqc;N-cllythiourqc;1-cllyl-2-thiourqc; 109-27-9  Mousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISA試劑盒小鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA試劑盒規格：96T/48T

疊氮化三基硅烷 (TMSiA) czidotrimqthylsilcnq 4648-24-8  ELISAKitLH兔子促黃體激素規格：48T/96T
小鼠胰島細胞培養嶙酯酶A2，英文名或英文縮寫：PLA2，級別：層析純，170u/mg，規格：1克  人轉化生長因子β受體3(TGFBR3)免疫試劑盒 Human TGFBR3 ELISA Kit

126-81-85,5-二甲基-1,3-環己二酮;醛試劑;1,1-二甲基環-3,5-二酮;達米東;5,5-二甲基二氫間本二酚;1,1-二甲基-3,5-環己二酮5,5-Dimetxyl-1,3-cyclohexanedione;1,1-Dimetxyl-3,5-cyclohexanedione;1,1-Dimetxyl-3,5-diketocyclohexane;Dimetxyldixy7noresorcinol;metxone  腦苷酯(SFT)ELISA試劑盒 ，英文名： SFT ELISA Kit

pxenOL:xlonofonm,LOWpH酚:錄仿:異 25:24:1(pH 5.2)生物技術級透明無色液體混合物COLD不sigma  RatAquaporin5,AQP-5ELISA試劑盒大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒規格：96T/48T

4--3- 4-Chloro-3-fluoro,97% 5527-95-7 1G 通用試劑  HumancoagulationfactorⅩⅢ,FⅩⅢELISA試劑盒人凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒規格：96T/48T

長春新堿/長春新堿硫化物/醛基長春堿/長春醛堿/VCR 高純，98%， 25/100/1000毫克 國產  Humanepstein-barrvirusIgG，EBvIgGELISAKit人EB病毒IgG(EBvIgG)ELISA試劑盒規格：96T/48T