小鼠腦靜脈血管組織提取物說明書

小鼠腦靜脈血管組織提取物【Brain: Normal Mouse Cerebral Venous Vascular Derivatives】

腦組織是指包容在顱腔內(nèi)的三大塊神經(jīng)纖維組織：大腦、腦干和小腦。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠腦靜脈血管組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運(yùn)輸和保存；

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

D00 DNA ladder（0000bp）  0次7-Keto-dehydroepiandrosterone56697-酮基去氫表雄酮

D00 II DNA ladder（0000bp）  0次7-Chloro,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-one11295

D00 plus DNA ladder（0000bp） 0次7-Benzyloxyindole28977-芐氧基吲哚

D00 plus II DNA ladder   0次7-Anilino-hydroxy-naphthalenesulfonic acid117-苯胺基-羥基-萘磺酸

DNA Marker I plus   0次7-Amino-methylcoumarin29317-氨基-甲基香豆素
Cryptotanshinone  中文名：隱丹參酮  分子式：C19H20O3  度：98.0%  兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISAKit  

Dihydroisotanshinone II  中文名：  分子式：C18H14O3  度：98.0%  兔轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISAKit              

Tanshinone IIA  中文名：丹參酮IIA  分子式：C19H18O3  度：98.5%  兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒  

2,6-Dimethoxy-1-acetonylquinol  中文名：  分子式：C11H14O5  度：%  兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒  

Latinone  中文名：  分子式：C22H16O5  度：98.0%  兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒
尼群地平  Nitrendipine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠白細(xì)胞介素17(IL-17)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-17 ELISA Kit

尼群地平(標(biāo)準(zhǔn)品)  Nitrendipine  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠白細(xì)胞介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1α ELISA Kit

華蟾毒它靈;華蟾素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Cinobufotalin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠白細(xì)胞介素1α(IL-1α/IL-1F1)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1α/IL-1F1 ELISA Kit

維甲酰酚胺  Fenretinide(4-HPR)  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1B)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1B ELISA Kit

2-氨基嘌呤,異腺嘌呤;異腺素;2-AP  2-Aminopurine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1β ELISA Kit

遠(yuǎn)華蟾蜍精(標(biāo)準(zhǔn)品)  Telocinobufagin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠白細(xì)胞介素1受體拮抗劑(IL-1RA)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1RA ELISA Kit

日蟾蜍他靈;和蟾毒他靈(標(biāo)準(zhǔn)品)  Gamabufotalin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠白細(xì)胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-2 ELISA Kit

蟾毒它靈(標(biāo)準(zhǔn)品)  Bufotaline  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠白細(xì)胞介素21(IL-21)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-21 ELISA Kit

黃尿酸  Xanthurenic Acid  質(zhì)量規(guī)格：>95%,進(jìn)口 小鼠白細(xì)胞介素24(IL24)ELISA試劑盒 ，英文名： IL24 ELISA Kit

舒巴坦酸  Sulbactam Acid  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠白細(xì)胞介素27(IL-27)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-27 ELISA Kit
小鼠腦靜脈血管組織提取物說明書脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  2-(2-Aminothiazole-4-yl)-2-methoxyiminoacetic acid  中文名：氨噻肟酸  分子式：C6H7N3O3S  度：98.0%

孕激素elisa試劑盒   孕激素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   孕激素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：孕激素試劑盒、孕激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Adipic dihydrazide  1071-93-8  中文名：己二酸二  分子式：C6H14N4O2  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

孕激素/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol  129141-48-6  中文名：  分子式：C8H16O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

孕激素/孕(PROG)ELISA試劑盒              Adrenosterone  中文名：腎上腺甾酮  分子式：C19H24O3 

孕激素/孕(PROG)ELISAKit     7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol  1207441-49-3  中文名：  分子式：C29H46O3