小鼠子宮平滑肌細胞提取物培養

小鼠子宮平滑肌細胞提取物【Mouse Uterus: Normal Uterus Derivatives】

小鼠子宮平滑肌細胞提取物是從小鼠原代子宮平滑肌細胞提取的，小鼠原代子宮平滑肌細胞從正常小鼠子宮組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

萊克多巴胺快速檢測卡（膠體金法）Benzoguanamine916苯代三聚胺

萊克多巴胺快速檢測卡（膠體金法）Benzalazine5888二芐肼

萊克多巴胺快速檢測卡（膠體金法）Benzofuroxan46苯并呋咱

氯霉素快速檢測卡（膠體金法）3-(2-Benzothiazolylthio)propionic acid4763-(2-苯并噻唑基硫代)

氯霉素快速檢測卡（膠體金法）(2-Benzothiazolylthio)acetic acid629572-(苯并噻唑基硫代)乙酸
Inositol   100g                 Quetiapine  111974-69-7  中文名：喹硫平  分子式：C21H25N3O2S 

Indole-3-ByicAcid(IBA)   5g  Quetiapine  中文名：喹硫平  分子式：C21H25N3O2S 

icine   100g                 3-Amino-5-phenylpyrazole  中文名：3-氨基-5-苯基吡唑  分子式：C9H9N3 

ichloroaceticAcid   500g  3-Aminoadamantan-1-ol  702-82-9  中文名：  分子式：C10H17NO 

I 型膠原 N 末端肽 (X)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  3'-Hydroxygynuramide II  中文名：  分子式：C42H83NO6  度：%
硝酸奧昔康唑（標準品）  Oxiconazole Nitrate  質量規格：HPLC法含量測定 小鼠生長抑素(SS)ELISA試劑盒 ，英文名： SS ELISA Kit

普瑞巴林（標準品）  Pregabalin  質量規格：HPLC法含量測定 小鼠生長因子(GH)ELISA檢測試劑盒Mousegrowthhormone,GHELISAKIT 96T/48T

(S)-(+)-苯乙醇酸（普瑞巴林雜質）（標準品）  [(S)-(+)-MandelicAcid] （Pregabalin impurity）  質量規格：供檢查用 小鼠視黃醇結合蛋白(RBP)ELISA檢測試劑盒MouseRetinol-bindingprotein,RBPELISAKit 96T/48T

山梨醇（標準品）  D-Sorbitol  質量規格：供檢查用 小鼠視黃醇結合蛋白(RBP)ELISA試劑盒 ，英文名： RBP ELISA Kit

乙二醇（標準品）  Ethylene Glycol  質量規格：供檢查用 小鼠視黃醇結合蛋白4(RBP-4)ELISA檢測試劑盒MouseRetinol-bindingprotein4,RBP-4ELISAKit 96T/48T

降二氫辣椒堿  Nordihydrocapsaicin  質量規格：HPLC≥95%,標準品 小鼠視黃醇結合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒 ，英文名： RBP-4 ELISA Kit

4-甲氨基安替比林（標準品）  4-(Methylamino)-antipyrine  質量規格：供檢查用 小鼠嗜環蛋白/親環素A(CyPA)ELISA檢測試劑盒MousecyclophilinA,CyPAELISAKit 96T/48T

硫酸肼（標準品）  Hydrazine sulfate  質量規格：供TLC法系統適用性試驗用 小鼠嗜環蛋白/親環素A(CyPA)ELISA試劑盒 ，英文名： CyPA ELISA Kit

硫酸肼（標準品）  Hydrazine sulfate  質量規格：供檢查用 小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒 ，英文名： Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit

環扁桃酯（標準品）  Cyclandelate  質量規格：HPLC法含量測定 小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA試劑盒 ，英文名： Eotaxin 2/CCL24 ELISA Kit
小鼠子宮平滑肌細胞提取物培養可溶性ENG/sCD105   英文名稱：   Human soluble Endoglin   規格：   48T/96T   英文縮寫：   ENG/sCD105  Paroxetine hydrochloride  中文名：鹽酸帕羅西汀  分子式：C19H21ClFNO3 

顆粒體蛋白Granulin   英文名稱：   Granulin   規格：   48T/96T   英文縮寫：   GRN  3-O-Acetylandrostenone hydrazone  122914-94-7  中文名：3-O-乙酰基雄酮腙  分子式：C21H32N2O2 

抗緊張素‖受體︱型自身抗體   英文名稱：   Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies   規格：   48T/96T   英文縮寫：   AT1R-AA  3-Amino-4-methylbenzamide  中文名：3-氨基-4-甲基苯甲酰胺  分子式：C8H10N2O  度：98.0%

抗緊張素‖受體︱型自身抗體   英文名稱：    Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies   英文縮寫：   AT1R-AA   規格：   48T/96T  Ophiopogonin D  中文名：麥冬皂苷D  分子式：C44H70O16 

抗酸性0酸酶（SACP）試劑盒（比色法）  Repaglinide  135062-02-1  中文名：瑞格列奈  分子式：Repaglinide  度：98.0%  關鍵詞：

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。