小鼠腦靜脈血管內皮細胞提取物說明書

小鼠腦靜脈血管內皮細胞提取物【Mouse Brain: Normal Cerebral Venous Vascular Endothelial CellsDerivatives】

小鼠腦靜脈血管內皮細胞提取物是從小鼠原代腦靜脈血管內皮細胞提取的，小鼠原代腦靜脈血管內皮細胞從正常小鼠腦組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

糠秕馬拉色菌 KB1mlAfatinib812阿法替尼

厚皮馬拉色菌 HP1mlAdynerigenin β-neritrioside887219

根癌農桿菌EHA51mlAdrenosterone3825腎上腺甾酮

谷氨酸棒狀桿菌ATCC1321mlAdipic dihydrazide713己二酸二酰肼

白色念珠菌ATCC2311mlAdenosine 5'-monophosphate6195'-腺嘌呤核苷酸
Humanplatelet-associatedCompleme3,PAC3ELISAKit人血小板相關補體3(PAC3)ELISA試劑盒規格：96T/48T  (+)-Noe's reagent  87248-50-8  中文名：(+)-核歐沃豪斯效應試劑  分子式：C24H38O3 

HumanPlateletassociatedaibody,PA-IgMELISAKit人血小板相關抗體IgM(PA-IgM)ELISA試劑盒規格：96T/48T  1-Testosterone  1965/6/5  中文名：1-睪酮  分子式：C19H28O2 

HumanplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒規格：96T/48T  1-Naphthol  中文名：  分子式：C10H8O 

Humanplateletactivatingfactor，PAFELISAKit人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規格：96T/48T  1-Monopalmitin  542-44-9  中文名：1-棕櫚酸單甘油酯  分子式：C19H38O4 

Humanplasminogenactivatorinhibitor1，PAI-1ELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒規格：96T/48T  1-Indanone  83-33-0  中文名：  分子式：C9H8O
硒吩(>98.0%(GC))  Selenophene  質量規格：>98.0%(GC) 小鼠胰島素降解酶(IDE)ELISA試劑盒 ，英文名： IDE ELISA Kit

2,2',7,7'-四-9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(T))  2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]  質量規格：>98.0%(T) 小鼠胰島素受體(ISR)ELISA試劑盒 ，英文名： ISR ELISA Kit

1,3,6,8-四芘(>98.0%(T))  1,3,6,8-Tetrabromopyrene  質量規格：>98.0%(T) 小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒 ，英文名： ISR-β ELISA Kit

2,2',7,7'-四-9,9-聯亞芴基(>98.0%(HPLC))  2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-bifluorenylidene  質量規格：>98.0%(HPLC) 小鼠胰島素受體底物1(IRS1)ELISA試劑盒 ，英文名： IRS1 ELISA Kit

酞菁銅(II)(α-型)(>90.0%(T))  Copper(II) Phthalocyanine (α-form)  質量規格：>90.0%(T) 小鼠胰島素受體底物2(IRS2)ELISA試劑盒 ，英文名： IRS2 ELISA Kit

酞菁銅(II)(β-型)(>90.0%(T))  Copper(II) Phthalocyanine (β-form)  質量規格：>90.0%(T) 小鼠胰島素樣蛋白3(INSL3)ELISA試劑盒 ，英文名： INSL3 ELISA Kit

三(1,3-二苯基-1,3-丙二酮基)(1,10-鄰二氮雜菲)銪(Ⅲ)(>95.0%(T))  Tris(1,3-diphenyl-1,3-propanedionato)(1,10-phenanthroline)europium(III)  質量規格：>95.0%(T) 小鼠胰島素樣蛋白5(INSL5)ELISA試劑盒 ，英文名： INSL5 ELISA Kit

3-(2-苯并噻唑基)-7-(二乙氨基)香豆素(>98.0%(HPLC)(T))  3-(2-Benzothiazolyl)-7-(diethylamino)coumarin  質量規格：>98.0%(HPLC)(T) 小鼠胰島素樣蛋白6(INSL6)ELISA試劑盒 ，英文名： INSL6 ELISA Kit

 3-(2-苯并咪唑基)-7-(二乙氨基)香豆素(>98.0%(T))  3-(2-Benzimidazolyl)-7-(diethylamino)coumarin  質量規格：>98.0%(T) 小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪(升華提)(>96.0%(HPLC))  4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene (purified by sublimation)  質量規格：>96.0%(HPLC) 小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA檢測試劑盒MouseInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit 96T/48T
小鼠腦靜脈血管內皮細胞提取物說明書尿激酶型纖溶酶原激活因子 (uPA)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  O-Benzyl-L-tyrosine  16652-64-5  中文名：O-芐基-L-酪氨酸  分子式：C16H17NO3  度：98.0%   

尿蛋白定性測試盒   Acid esterase stain                 3-Quinuclidinone  中文名：3-奎寧環酮  分子式：C7H11NO 

內脂素/內臟脂肪素   英文名稱：   Visfatin   規格：   48T/96T   英文縮寫：   Visfatin  Otophylloside T  1642306-14-6  中文名：  分子式：C48H70O18 

內脂素 / 內臟脂肪素 (Visfatin)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  Ondansetron  中文名：昂丹司瓊  分子式：C18H19N3O 

內源性糖皮質激素   英文名稱：   Human Glucocoicoid Endogenous   規格：   48T/96T   英文縮寫：   GC  Androstenediol  521-17-5  中文名：雄烯二醇  分子式：C19H30O2