大鼠大隱靜脈組織提取物說明書

大鼠大隱靜脈組織提取物【Rat Vascular : Normal Saphenous Vein Derivatives】

大隱靜脈是長的靜脈，靜脈血管壁薄、內腔大，內膜折疊形成靜脈瓣。靜脈瓣一般成對排列，呈半月狀小袋，袋口朝向心，利于靜脈回流，防止血液逆流。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠大隱靜脈組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

CTP 5’-三磷酸胞苷二鈉   mg2-(2-Aminoethyl)-methylpyrrolidine51382-(2-氨乙基)-N-甲基

Cytosine 胞嘧啶   5g2-(2-Aminobenzoyl)-benzoic acid114732-(2-甲酰)-苯甲酸

D-(+)Galactose D-半乳糖   25g 2-(2,2-Dimethyl,3-dioxolan-yl)propane,2-diol1291418

D-(+)-Galacturonic acid D-半乳糖醛酸   1g 1-Testosterone1965/6/51-睪酮

DAB 3,3’-二氨基胺四鹽酸水合物   1g/ 5g1-O-Methylnataloe-emodin33921
Coumarin 6  中文名：香豆素 6  分子式：C20H18N2O2S  度：98.0%  小鼠白介素-17(mouse IL-17)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  

Benzotetramisole  中文名：苯并四咪唑  分子式：C15H12N2S  度：98.0%  小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒  

Anthraflavic acid  中文名：二羥蒽醌  分子式：C14H8O4  度：98.0%  小鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒  

1,4-Benzodioxane-6-carboxylic acid  中文名：1,4-苯并二氧六環-6-羧酸  分子式：C9H8O4  度：98.0%  小鼠八聚體結合轉錄因子4（OCT4）ELISA試劑盒  

Benactyzine hydrochloride  中文名：鹽酸貝那替嗪  分子式：C20H26ClNO3  度：98.0%  小鼠基脲敏感性胺氧化酶（SSAO）ELISA試劑盒
內消旋-2,3-二巰基丁二酸(>98.0%(T))  meso-2,3-Dimercaptosuccinic Acid  質量規格：>98.0%(T) 人玻連蛋白(VTN)試劑盒 Human vionectin ELISA Kit

吡哆醛-L-谷氨酸二鉀鹽[藥物研究配體]  Pyridoxylidene-L-glutamic Acid Dipotassium Salt  質量規格：藥物研究配體 人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA檢測試劑盒Humanvionectin,VELISAKit 96T/48T

吡哆醛-L-異亮氨酸鉀鹽[藥物研究配體]  Pyridoxylidene-L-isoleucine Potassium Salt  質量規格：藥物研究配體 人補體1q(C1q)ELISA檢測試劑盒HumanCompleme1q,C1qELISAKit 96T/48T

1,4,7,10-四氮雜環十二烷四鹽酸鹽(>98.0%(N))  1,4,7,10-Tetraazacyclododecane Tetrahydrochloride  質量規格：>98.0%(N) 人補體1q(C1q)試劑盒 Human Compleme 1q ELISA Kit

己二酸雙(2-乙基己基)酯(>98.0%(GC))  Bis(2-ethylhexyl) Adipate  質量規格：>98.0%(GC) 人補體1抑制物抗體-IgG(C1INH-IgG)試劑盒 Human Compleme 1 inhibitor aoaibody-IgG,C1INH-IgG ELISA Kit

3,4-苯并芘(升華精制品)(>95.0%(GC))  3,4-Benzopyrene (purified by sublimation)  質量規格：>95.0%(GC) 人補體1抑制物抗體-IgM(C1INH-IgM)試劑盒 Human Compleme 1 inhibitor aoaibody-IgM,C1INH-IgM ELISA Kit

雙(苯乙酰)二硫化物(>98.0%(HPLC))  Bis(phenylacetyl) Disulfide  質量規格：>98.0%(HPLC) 人補體3裂解產物(C3SP)試劑盒 Human Compleme 3 split product,C3SP ELISA Kit

苯并紅紫4B[pH指示劑]  Benzopurpurine 4B  質量規格：pH指示劑 人補體7(C7)試劑盒 Human Compleme 7 ELISA Kit

五甲氧基紅(>98.0%(HPLC))  Pentamethoxy Red  質量規格：>98.0%(HPLC) 人補體C1q腫瘤壞死因子相關蛋白1(C1QTNF1/CP1)試劑盒 Human C1QTNF1 ELISA Kit

苯甲基橙(>95.0%(W))  Benzyl Orange  質量規格：>95.0%(W) 人補體蛋白3(C3)試劑盒 Human Compleme 3,C3 ELISA Kit
大鼠大隱靜脈組織提取物說明書組織多肽抗原(TPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  2,2'-Bicinchoninic acid  1245-13-2  中文名：2,2'-二辛可寧酸  分子式：C20H12N2O4  度：98.0%   

組胺(HIS)ELISAKit     Albendazole  54965-21-8  中文名：阿苯達唑  分子式：C12H15N3O2S 

組胺(HIS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  2-(Phenylmethoxy)-naphthalene  中文名：2-萘酚芐基醚  分子式：C17H14O  度：98.0%

轉化生長因子β1elisa試劑盒   轉化生長因子β1試劑盒   規格型號：96T/48T   轉化生長因子β1試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：轉化生長因子β1試劑盒、轉化生長因子β1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Agomelatine  138112-76-2  中文名：阿戈美拉汀  分子式：C15H17NO2  度：98.0%  關鍵詞： 

轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒     Afatinib  850140-72-6  中文名：阿法替尼  分子式：C24H25ClFN5O3  度：98.0%

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。