小鼠腎集合管細(xì)胞（SV40轉(zhuǎn)化）；M-1說(shuō)明書(shū)

冷凍保存細(xì)胞之方法：
615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株；L7712說(shuō)明書(shū)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1說(shuō)明書(shū)采用干冰運(yùn)輸，經(jīng)過(guò)逐步的降溫，冷藏在-196℃度的液氮罐中，暫時(shí)停止其生命活動(dòng)，保存其活性，使您的實(shí)驗(yàn)更生動(dòng),公司代理品牌有：ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.
細(xì)胞種類：
*種：
小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1說(shuō)明書(shū)是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
購(gòu)買客戶請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購(gòu)的細(xì)胞名稱、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說(shuō)明書(shū)并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。
收到小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1說(shuō)明書(shū)如何處理？
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
產(chǎn)品描述：
細(xì)胞名稱 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1說(shuō)明書(shū)
形態(tài)特性上皮樣

生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)

特征特性該細(xì)胞源于tg(SV40E)Bri7轉(zhuǎn)基因小鼠的正常腎組織，含SV40病毒的DNA序列，保留了皮質(zhì)集合管的某些特性，如

態(tài)和CCD（皮質(zhì)結(jié)合管）抗原。大多M-1細(xì)胞的克隆具有皮質(zhì)集合管中閏細(xì)胞或主細(xì)胞的特征；5%~10%的細(xì)胞有閏細(xì)胞和主細(xì)胞的雙重表型。當(dāng)該細(xì)胞在滲透性支持物上生長(zhǎng)時(shí)，可

成具有負(fù)跨膜電位差的腔樣結(jié)構(gòu)。

培養(yǎng)條件DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS

傳代方法1:3~1:4傳代；每周換液2~3次。

傳代情況C4

凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè)培養(yǎng)法（-）

STR-

同工酶

染色體
主要功能：
（1）小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1說(shuō)明書(shū)血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2） 表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
生理變化：
（1）主動(dòng)脈硬化。
（2）主動(dòng)脈瘤
（3）主動(dòng)脈鈣化。
小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1說(shuō)明書(shū)基本特性：
（1）組織來(lái)源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
（2）鑒定：肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（5）肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

以下是小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1說(shuō)明書(shū)的相關(guān)產(chǎn)品,點(diǎn)擊進(jìn)入了解更多小鼠源細(xì)胞。
*Anti-MCP-3/CCL7/FITC熒光素標(biāo)記單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體(大、小鼠)IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-MC-1R/FITC熒光素標(biāo)記黑素皮質(zhì)素受體抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-M-CSF/FITC熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-M-CSFReceptor/FITC熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-Mcpt7/TryptaseBeta1/FITC熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠肥大細(xì)胞蛋白酶7抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-TPSB2/TryptaseBeta2/FITC熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠肥大細(xì)胞類胰蛋白酶β2IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-MCT1/FITC熒光素標(biāo)記單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-MDM2/FITC熒光素標(biāo)記雙微體2癌基因抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-Phospho-MDM2(Ser166)/FITC熒光素標(biāo)記磷酸化雙微體2癌基因抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-Mdr-1/FITC熒光素標(biāo)記多藥耐藥蛋白抗體IgG規(guī)格：0.2ml
小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1說(shuō)明書(shū)*Anti-CRLR/CALCRL/FITC熒光素標(biāo)記降鈣素受體樣蛋白抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CRMP2/Dpysl2(collapsinresponsemediatorprotein-2)/FITC熒光素標(biāo)記抗二氫嘧啶酶樣2抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-Phospho-CRMP-2(Thr514)/FITC熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CRP/Biotin生物素化C-反應(yīng)蛋白抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CRP/FITC熒光素標(biāo)記C-反應(yīng)蛋白抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CRP/HRP辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記鼠抗人C-反應(yīng)蛋白單克隆抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CRTAM/FITC熒光素標(biāo)記CRTAM抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-C-SKI/FITC熒光素標(biāo)記抗C-SKI抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CSIG/FITC熒光素標(biāo)記細(xì)胞衰老抑制基因抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CSP/FITC熒光素標(biāo)記環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲(chóng))抗體IgG規(guī)格：0.2ml

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品描述：
細(xì)胞名稱 615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株；L7712說(shuō)明書(shū)
形態(tài)特性腹水型

生長(zhǎng)特性體內(nèi)生長(zhǎng)

特征特性1977年建立；615系小鼠自發(fā)腹水型淋巴細(xì)胞性白血病，同系小鼠腹腔注入腹水及傳代，移植*，侵襲全身組織及器官。

培養(yǎng)條件-

傳代方法制備成細(xì)胞懸液接種至615小鼠。

傳代情況不詳

凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè)培養(yǎng)法（-）

STR-

同工酶

染色體-

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株；L7712說(shuō)明書(shū)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項(xiàng)：
?1.一般客戶拿到615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株；L7712說(shuō)明書(shū)后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開(kāi)封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
*Anti-HRH3/GPCR97/FITC熒光素標(biāo)記組織胺H3受體抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-HRH4/GPCR105/FITC熒光素標(biāo)記組織胺H4受體抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-LOX-1/OLR1/FITC熒光素標(biāo)記凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-Lpin1protein/FITC熒光素標(biāo)記Lpin1抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-Lpin1protein/FITC熒光素標(biāo)記Lpin1抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-LPL/FITC熒光素標(biāo)記脂蛋白脂酶抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-LPLUNC1/FITC熒光素標(biāo)記人鼻咽癌癌基因抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-Lp-PLA2/FITC熒光素標(biāo)記抗脂蛋白磷脂酶A2抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-LRIG1/FITC熒光素標(biāo)記抗LRIG1抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-LRIG2/FITC熒光素標(biāo)記抗LRIG2抗體IgG規(guī)格：0.2ml
615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株；L7712說(shuō)明書(shū)*Anti-CK19/RBITC紅色熒光素羅丹明標(biāo)記細(xì)胞角蛋白19抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CK20/FITC熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白20抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CK34BetaE12/FITC熒光素標(biāo)記高分子量角蛋白CK34βE12抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CK-HMW/FITC熒光素標(biāo)記高分子量細(xì)胞角蛋白抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CKMT2/FITC熒光素標(biāo)記肌酸磷酸激酶2抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CKIP-1/FITC熒光素標(biāo)記酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CKLFSF2(human)/FITC熒光素標(biāo)記人類新細(xì)胞因子/趨化素樣因子超家族成員2抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CLCA4/FITC熒光素標(biāo)記鈣激活氯離子通道4抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CLDN1/FITC熒光素標(biāo)記緊密連接蛋白1抗體(C端)IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CLDN1/FITC熒光素標(biāo)記緊密連接蛋白1抗體IgG規(guī)格：0.2ml
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