細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人肺癌細胞;A549 [A-549]圖片準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,人肺癌細胞;A549 [A-549]圖片貨期短,價格優,售后齊全。點擊進入了解更多腫瘤細胞。 產品描述: 細胞名稱 人肺癌細胞;A549 [A-549]圖片 形態特性上皮樣;多角 生長特性貼壁生長 特征特性該細胞系是1972年由GiardDJ通過肺癌組織移植培養建系的,源自一位58歲的白人男性。A549能通過胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂;角蛋白陽性。 培養條件RPMI1640(w/oHepes)15%NBS 傳代方法1:3傳代;3-4天一次 傳代情況PN9 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測熒光法(-) STRAmelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:14,17;D19S433:13;D21S11:29;D2S1338:24;D3S1358:16;D5S818:11;D7S820:8,11;D8S1179:13,14;FGA:23;TH01:8,9.3;TPOX:8,11;vWA:14; 同工酶 染色體62-66
注意事項: ?1.一般客戶拿到人肺癌細胞;A549 [A-549]圖片后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 *Anti-Insulin/FITC熒光素標記標記胰島素抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Insulin/FITC熒光素標記胰島素抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Insulin(1-51protein)/FITC熒光素標記胰島素1-51蛋白抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Integrinalpha1/CD49a/FITC熒光素標記整合素α1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-IntegrinAlpha2/CD49b/FITC熒光素標記整合素α2抗體IgG規格:0.2ml *Anti-IntegrinAlpha2b/CD41/FITC熒光素標記血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體IgG規格:0.2ml *Anti-IntegrinAlpha3/FITC熒光素標記整合素α3抗體IgG規格:0.2ml *Anti-IntegrinAlpha3Beta1/FITC熒光素標記整合素α3β1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Integrina7/FITC熒光素標記整合素α7抗體IgG規格:0.2ml *Anti-IntegrinAlphaE2/CD103/FITC熒光素標記整合素αE2抗體IgG規格:0.2ml 人肺癌細胞;A549 [A-549]圖片*Anti-CD34/PE熒光素PE標記CD34抗體(細胞表面的唾液粘蛋白)IgG規格:0.2ml *Anti-CR1/CD35/FITC熒光素標記Ⅰ型補體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)IgG規格:0.2ml *Anti-CD36/FITC熒光素標記CD36抗體IgG規格:0.2ml *Anti-CD38(human)/FITC熒光素標記抗CD38抗體(人)IgG規格:0.2ml *Anti-CD38(mouse,rat)/FITC熒光素標記抗CD38抗體(小鼠、大鼠)IgG規格:0.2ml *Anti-CD40L/FITC熒光素標記抗CD40L抗體IgG規格:0.2ml *Anti-CD34/RBITC紅色熒光素羅丹明標記CD34抗體IgG規格:0.2ml *Anti-CD44/FITC熒光素標記CD44抗體IgG規格:0.2ml *Anti-CD43/SPN/FITC熒光素標記CD43抗體IgG規格:0.2ml *Anti-CD44/RBITC紅色熒光素羅丹明標記CD44抗體IgG規格:0.2ml 冷凍保存細胞之方法: 人肺癌細胞;A549 [A-549]圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |