細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人大細胞肺癌細胞;NCI-H460 [H460]圖片準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,人大細胞肺癌細胞;NCI-H460 [H460]圖片貨期短,價格優,售后齊全。點擊進入了解更多腫瘤細胞。 產品描述: 細胞名稱 人大細胞肺癌細胞;NCI-H460 [H460]圖片 形態特性上皮樣 生長特性貼壁生長 特征特性NCI-H460細胞株從一位大細胞肺癌患者的胸水中建立。細胞表達的p53mRNA易于檢測,其水平與正常肺細胞相當,未表現出DNA總體結構異常。角蛋白和波 蛋白纖維染色陽性,神經絲三聯體蛋白陰性。 培養條件RPMI1640(w/oHepes)優質胎牛血清,10% 傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。 傳代情況P(139+5) 凍存條件*培養基+8%DMSO 支原體檢測陰性 STRAmelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:13;D16S539:9;D18S51:13,15;D19S433:14;D21S11:30;D2S1338:17,25;D3S1358:15,18;D5S818:9,10;D7S820:9,12;D8S1179:12;FGA:21,23;TH01:9.3;TPOX:8;vWA:17 同工酶 染色體
注意事項: ?1.一般客戶拿到人大細胞肺癌細胞;NCI-H460 [H460]圖片后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 *Anti-IGF-I/FITC熒光素標記標記胰島素樣生長因子-I抗體IgG規格:0.2ml *Anti-IGF-II/FITC熒光素標記胰島素樣生長因子-II抗體IgG規格:0.2ml *Anti-IGF-IIBP3/FITC熒光素標記胰島素樣生長因子2mRNA結合蛋白3抗體IgG規格:0.2ml *Anti-IGF-1R/FITC熒光素標記胰島素樣生長因子-I受體抗體IgG規格:0.2ml *Anti-IGF-1R/FITC熒光素標記胰島素樣生長因子-I受體抗體IgG規格:0.2ml *Anti-phospho-IGF1Receptor(Tyr1161)/FITC熒光素標記磷酸化胰島素樣生長因子1受體抗體IgG規格:0.2ml *Anti-IGFBP-1/FITC熒光素標記胰島素樣生長因子結合蛋白-1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-IGFBP-2/FITC熒光素標記胰島素樣生長因子結合蛋白-2抗體IgG規格:0.2ml *Anti-IGFBP-3/FITC熒光素標記胰島素樣生長因子結合蛋白-3抗體IgG規格:0.2ml *Anti-IGFBP-4/IBP4/FITC熒光素標記胰島素樣生長因子結合蛋白-4抗體IgG規格:0.2ml 人大細胞肺癌細胞;NCI-H460 [H460]圖片*Anti-Caspase-9/FITC熒光素標記白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Caspase-9/FITC熒光素標記白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Phospho-Caspase-9(Pry153)/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Caspase-10/FITC熒光素標記半胱胺酸蛋白酶-10抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Caspase-12(hunman)/FITC熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體(人)IgG規格:0.2ml *Anti-Caspase-12/FITC熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Caspase-13/FITC熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Phospho-Caspase-9(Thr125)/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Alpha-Catenin/Alpha-cats/FITC熒光素標記α-連環蛋白抗體(α-α鏈接素)IgG規格:0.2ml *Anti-Beta-catenin/Beta-cats/FITC熒光素標記β-連環蛋白抗體IgG規格:0.2ml 冷凍保存細胞之方法: 人大細胞肺癌細胞;NCI-H460 [H460]圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |