冷凍保存細(xì)胞之方法: 人肺鱗癌細(xì)胞;NCI-H226 [H226]價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 產(chǎn)品描述: 細(xì)胞名稱 人肺鱗癌細(xì)胞;NCI-H226 [H226]價格 形態(tài)特性上皮樣 生長特性貼壁生長 特征特性1980年分離建立。 培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)10%FBS 傳代方法1:4-1:8,每2~3天傳代。 傳代情況 凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測陰性 STR 同工酶 染色體
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)人肺鱗癌細(xì)胞;NCI-H226 [H226]價格準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 二.細(xì)胞處理: 1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 注意事項: ?1.一般客戶拿到人肺鱗癌細(xì)胞;NCI-H226 [H226]價格后,應(yīng)該注意什么? 客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細(xì)胞。 收到細(xì)胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。 細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些? (1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā); (2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā); (5)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā); (6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā); (7)視具體情況而定。 *Anti-GPC3/FITC熒光素標(biāo)記磷脂酰基醇蛋白聚糖-3抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-GPR14/FITC熒光素標(biāo)記G蛋白偶聯(lián)受體14抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-GPR30/FITC熒光素標(biāo)記G蛋白偶聯(lián)受體30抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-GProtein/FITC熒光素標(biāo)記G蛋白/鳥苷酸結(jié)合蛋白抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-GRP78/FITC熒光素標(biāo)記G蛋白偶聯(lián)受體78抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-GR/FITC熒光素標(biāo)記糖皮質(zhì)激素受體抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-GPNMB/Osteoactivin/FITC熒光素標(biāo)記GPNMB抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-Phospho-GlucocorticoidReceptor(Ser211)/FITC熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化糖皮質(zhì)激素受體抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-GRB2/ASH/FITC熒光素標(biāo)記生長因子受體結(jié)合蛋白2抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-GPR109A/HM74A/FITC熒光素標(biāo)記G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體IgG規(guī)格:0.2ml 人肺鱗癌細(xì)胞;NCI-H226 [H226]價格*Anti-ANXA1(AnnexinA1)/FITC熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白A1抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-AP/ALP/FITC熒光素標(biāo)記抗堿性磷酸酶抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-betaAdaptin/AP2/FITC熒光素標(biāo)記銜接蛋白β抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-Gamma-Adaptin/FITC熒光素標(biāo)記銜接蛋白γ抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-AP2alpha/FITC熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-alphaAdaptin/FITC熒光素標(biāo)記銜接蛋白1抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-Apaf-1/FITC熒光素標(biāo)記凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-Apaf-1/FITC熒光素標(biāo)記凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-ProteinC/FITC熒光素標(biāo)記APC活化蛋白C抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-Apelin/FITC熒光素標(biāo)記脂肪炎癥因子Apelin抗體IgG規(guī)格:0.2ml 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,人肺鱗癌細(xì)胞;NCI-H226 [H226]價格貨期短,價格優(yōu),售后齊全。點擊進入了解更多腫瘤細(xì)胞。 |