細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人肝癌細胞;SMMC-7721價格準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,人肝癌細胞;SMMC-7721價格貨期短,價格優,售后齊全。點擊進入了解更多腫瘤細胞。 產品描述: 細胞名稱 人肝癌細胞;SMMC-7721價格 形態特性上皮細胞樣 生長特性貼壁生長 特征特性取人肝癌組織,采用靜置和旋轉管法培養11天細胞開始生長,*傳代23天。AFP陽性。用Northernblot方法,未能檢測到細胞中1.3kbLFIRE-1/HFREP-1mRNA的表達,免疫缺陷小鼠體內可成瘤。 培養條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS 傳代方法1:3傳代,2-3天傳一代 傳代情況C65 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測陰性 STR 同工酶同工酶鑒定 染色體
注意事項: ?1.一般客戶拿到人肝癌細胞;SMMC-7721價格后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 *Anti-GFP/FITC熒光素標記綠色熒光蛋白抗體IgG規格:0.2ml *Anti-GFP/FITC(GreenFluorecentprotein)熒光素標記兔抗綠色熒光蛋白抗體IgG規格:0.2ml *Anti-humanFibrinogen/Biotin生物素化兔抗人纖維蛋白原規格:0.2ml *Anti-GFRAlpha-1/GDNF/FITC熒光素標記GDNF家族受體α-1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-GFRA4/FITC熒光素標記GDNF家族受體α-4抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Melamine/Biotin生物素標記兔抗三聚氰胺抗體IgG規格:0.2ml *Anti-GHR/FITC熒光素標記生長激素受體抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Ghrelin/FITC熒光素標記腦腸肽抗體(一種新的生長激素釋放肽)IgG規格:0.2ml *Anti-GHRF/GHRH/FITC熒光素標記生長激素釋放激素因抗體IgG規格:0.2ml *Anti-GIP/FITC熒光素標記胃泌素抑制肽抗體IgG規格:0.2ml 人肝癌細胞;SMMC-7721價格*Anti-AK-1/FITC熒光素標記腺苷酸激酶-1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-ADK/adenylatekinase/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠腺苷酸激酶抗體IgG規格:0.2ml *Anti-AKAP95/AKAP8/FITC熒光素標記蛋白激酶A錨定蛋白95抗體IgG規格:0.2ml *Anti-AKT2/FITC熒光素標記蛋白激酶B2抗體IgG規格:0.2ml *Anti-phospho-Akt/FITC熒光素標記抗磷酸化蛋白激酶B抗體IgG規格:0.2ml *Anti-CEA/Gold膠體金標記癌胚抗原抗體IgG規格:0.2ml *Anti-AldolaseA/FITC熒光素標記醛縮酶A抗體IgG規格:0.2ml *Anti-ALK/CD246Ag/FITC熒光素標記間變型淋巴瘤激酶抗體IgG規格:0.2ml *Anti-phospho-ALK/CD246(Tyr1586)/FITC熒光素標記兔抗人、大鼠磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體IgG規格:0.2ml *Anti-ALK/CD246(phosphoTyr1278/1282/1283)/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體IgG規格:0.2ml 冷凍保存細胞之方法: 人肝癌細胞;SMMC-7721價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |