細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人子宮內膜腺癌細胞;KLE培養準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,人子宮內膜腺癌細胞;KLE培養貨期短,價格優,售后齊全。點擊進入了解更多腫瘤細胞。 產品描述: 細胞名稱 人子宮內膜腺癌細胞;KLE培養 形態特性上皮樣;多角 生長特性貼壁生長 特征特性該細胞系源自一名64歲白人女性的子宮內膜腫瘤組織,由GRRichardson于1984年建系。細胞染色體為非整倍體,數目范圍在51-66之間。裸鼠植瘤后,其腫瘤標本在電鏡下顯示,細胞間見緊密相連,細胞表面具有微絨毛。其 態特征與孕激素刺激后的子宮內膜相似。 培養條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS 傳代方法1:3傳代,2-3天傳一代 傳代情況C11 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測陰性 STRSTR鑒定 同工酶 染色體
注意事項: ?1.一般客戶拿到人子宮內膜腺癌細胞;KLE培養后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 *Anti-Gab1/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠接頭蛋白Gab1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Gab2/FITC熒光素標記接頭蛋白Gab2抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Phospho-Gab1(Tyr627)/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化接頭蛋白Gab1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Phospho-Gab1(Tyr659)/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化接頭蛋白Gab1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-GABA-ARAlpha1/FITC熒光素標記γ1氨基丁酸受體α1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-GABA-B-R1/FITC熒光素標記抗g-氨基丁酸B1受體抗體IgG規格:0.2ml *Anti-GABA/FITC熒光素標記兔抗γ1氨基丁酸抗體IgG規格:0.2ml *Anti-GABAB2/FITC熒光素標記抗g-氨基丁酸B2受體抗體IgG規格:0.2ml *Anti-phospho-GAB2(Ser623)/FITC熒光素標記磷酸化接頭蛋白Gab2抗體體IgG規格:0.2ml *Anti-phospho-GAB2(Tyr452)/FITC熒光素標記磷酸化接頭蛋白Gab2抗體IgG規格:0.2ml 人子宮內膜腺癌細胞;KLE培養*Anti-Phospho-Ack1(Tyr326)/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化Ack1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-ACTH1-39/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠ACTH抗體IgG規格:0.2ml *Anti-ACTH(7-23)/FITC熒光素標記促腎上腺皮質激素(7-23)抗體IgG規格:0.2ml *ACTH(18-39)/FITC熒光素標記ACTH(18-39)抗體IgG規格:0.2ml *Anti-ActinAlpha/Alpha-SMA/FITC熒光素標記Actinα蛋白抗體IgG規格:0.2ml *Anti-ActinAlpha/Alpha-SMA/RBITC紅色熒光素標記肌動蛋白α抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Beta-Actin/FITC熒光素標記β-肌動蛋白抗體IgG規格:0.2ml *Anti-F-Actin/FITC熒光素標記抗F-肌動蛋白抗體規格:0.2ml *Anti-Alpha-ACTN4/FITC熒光素標記抗α-輔肌動蛋白4抗體IgG規格:0.2ml *Anti-ADAM-TS1/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型抗體IgG規格:0.2ml 冷凍保存細胞之方法: 人子宮內膜腺癌細胞;KLE培養冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |